山地农业生物学报
山地農業生物學報
산지농업생물학보
JOURNAL OF MOUNTAIN AGRICULTURE AND BIOLOGY
2011年
5期
425-428,433
,共5页
易琼%张毅%李圆方%王鲁
易瓊%張毅%李圓方%王魯
역경%장의%리원방%왕로
改良型混合酶消化法%乳腺上皮细胞%角蛋白18%小鼠
改良型混閤酶消化法%乳腺上皮細胞%角蛋白18%小鼠
개량형혼합매소화법%유선상피세포%각단백18%소서
采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶混合(1∶1∶1)消化乳腺组织,并用差速贴壁法纯化培养乳腺上皮细胞,倒置显微镜下观察细胞的形态,并用角蛋白18免疫荧光染色的方法对细胞进行鉴定.结果表明:改良型混合酶消化法能获得较多的细胞团,且12 h后细胞团绝大多数已贴在细胞瓶壁,72h后细胞团完全铺开呈单层融合,细胞呈典型的铺路石样.免疫荧光鉴定结果显示,角蛋白18呈阳性反应.因此,应用改良型混合酶消化法能在短时间内获得大量较纯的乳腺上皮细胞.
採用Ⅰ型、Ⅱ型膠原酶和胰蛋白酶混閤(1∶1∶1)消化乳腺組織,併用差速貼壁法純化培養乳腺上皮細胞,倒置顯微鏡下觀察細胞的形態,併用角蛋白18免疫熒光染色的方法對細胞進行鑒定.結果錶明:改良型混閤酶消化法能穫得較多的細胞糰,且12 h後細胞糰絕大多數已貼在細胞瓶壁,72h後細胞糰完全鋪開呈單層融閤,細胞呈典型的鋪路石樣.免疫熒光鑒定結果顯示,角蛋白18呈暘性反應.因此,應用改良型混閤酶消化法能在短時間內穫得大量較純的乳腺上皮細胞.
채용Ⅰ형、Ⅱ형효원매화이단백매혼합(1∶1∶1)소화유선조직,병용차속첩벽법순화배양유선상피세포,도치현미경하관찰세포적형태,병용각단백18면역형광염색적방법대세포진행감정.결과표명:개량형혼합매소화법능획득교다적세포단,차12 h후세포단절대다수이첩재세포병벽,72h후세포단완전포개정단층융합,세포정전형적포로석양.면역형광감정결과현시,각단백18정양성반응.인차,응용개량형혼합매소화법능재단시간내획득대량교순적유선상피세포.