东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
6期
121-125
,共5页
杨洪雁%张宜强%杜智恒%白秀娟
楊洪雁%張宜彊%杜智恆%白秀娟
양홍안%장의강%두지항%백수연
黑龙江林蛙%正交设计%体系优化%ISSR-PCR体系
黑龍江林蛙%正交設計%體繫優化%ISSR-PCR體繫
흑룡강림와%정교설계%체계우화%ISSR-PCR체계
以黑龙江林蛙为材料,使用引物ISSR807,采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg2+、dNTPs、引物、DNA聚合酶、模板进行体系优化,对引物的最佳退火温度进行选择,建立适合黑龙江林蛙的ISSR-PCR分析的最佳体系:在25μL总体积中,包含10×PCR Buffer 2.5μL,Mg2+4.0mmol·L-1,dNTPs 0.15mmol·L-1,引物0.3μmol·L-1,TaqDNA聚合酶0.5U,DNA模板2.0ng·μL-1,最佳退火温度53.8℃.为利用该技术对黑龙江林蛙遗传多样性分析和构建遗传图谱提供一定的依据.
以黑龍江林蛙為材料,使用引物ISSR807,採用正交優化方法對影響PCR反應的Mg2+、dNTPs、引物、DNA聚閤酶、模闆進行體繫優化,對引物的最佳退火溫度進行選擇,建立適閤黑龍江林蛙的ISSR-PCR分析的最佳體繫:在25μL總體積中,包含10×PCR Buffer 2.5μL,Mg2+4.0mmol·L-1,dNTPs 0.15mmol·L-1,引物0.3μmol·L-1,TaqDNA聚閤酶0.5U,DNA模闆2.0ng·μL-1,最佳退火溫度53.8℃.為利用該技術對黑龍江林蛙遺傳多樣性分析和構建遺傳圖譜提供一定的依據.
이흑룡강림와위재료,사용인물ISSR807,채용정교우화방법대영향PCR반응적Mg2+、dNTPs、인물、DNA취합매、모판진행체계우화,대인물적최가퇴화온도진행선택,건립괄합흑룡강림와적ISSR-PCR분석적최가체계:재25μL총체적중,포함10×PCR Buffer 2.5μL,Mg2+4.0mmol·L-1,dNTPs 0.15mmol·L-1,인물0.3μmol·L-1,TaqDNA취합매0.5U,DNA모판2.0ng·μL-1,최가퇴화온도53.8℃.위이용해기술대흑룡강림와유전다양성분석화구건유전도보제공일정적의거.
