中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2001年
4期
355-358
,共4页
刘明远%黎诚耀%吴秀萍%J F Fabien%付宝权%C Trap%卢强%张西臣%P Boireau
劉明遠%黎誠耀%吳秀萍%J F Fabien%付寶權%C Trap%盧彊%張西臣%P Boireau
류명원%려성요%오수평%J F Fabien%부보권%C Trap%로강%장서신%P Boireau
旋毛虫%新生幼虫%期特异性基因%差减文库
鏇毛蟲%新生幼蟲%期特異性基因%差減文庫
선모충%신생유충%기특이성기인%차감문고
利用差减杂交（减法杂交，subtractivehybridization）技术，以旋毛虫新生幼虫（newbornlarvae,NBL）的cDNA作为试验方（tester），以肌幼虫+成虫的cDNA作为驱动方（driver），制备新生幼虫差减cDNA；利用T载体构建NBL差减cDNA文库，获克隆株90个。以试验方的差减cDNA第2次PCR产物+未差减cDNA为试验方探针，以驱动方的差减cDNA第2次PCR产物+未差减cDNA为驱动方探针，在NBL差减cDNA文库中初筛NBL的期特异性克隆，获初筛克隆24个。这些初筛期特异性克隆进一步用Southernblot确认鉴定，获真阳性期特异性克隆2个（NBLSSC1,NBLSSC2）。DNASIS以及Blaster的分析结果显示，这2个克隆为旋毛虫的2个新基因，其中NBLSSC1编码糖蛋白，NBLSSC2编码丝氨酸蛋白酶。本试验为旋毛虫期特异性基因全长序列的调取、分析、鉴定以及强保护性抗原基因的筛选奠定了基础。
利用差減雜交（減法雜交，subtractivehybridization）技術，以鏇毛蟲新生幼蟲（newbornlarvae,NBL）的cDNA作為試驗方（tester），以肌幼蟲+成蟲的cDNA作為驅動方（driver），製備新生幼蟲差減cDNA；利用T載體構建NBL差減cDNA文庫，穫剋隆株90箇。以試驗方的差減cDNA第2次PCR產物+未差減cDNA為試驗方探針，以驅動方的差減cDNA第2次PCR產物+未差減cDNA為驅動方探針，在NBL差減cDNA文庫中初篩NBL的期特異性剋隆，穫初篩剋隆24箇。這些初篩期特異性剋隆進一步用Southernblot確認鑒定，穫真暘性期特異性剋隆2箇（NBLSSC1,NBLSSC2）。DNASIS以及Blaster的分析結果顯示，這2箇剋隆為鏇毛蟲的2箇新基因，其中NBLSSC1編碼糖蛋白，NBLSSC2編碼絲氨痠蛋白酶。本試驗為鏇毛蟲期特異性基因全長序列的調取、分析、鑒定以及彊保護性抗原基因的篩選奠定瞭基礎。
이용차감잡교（감법잡교，subtractivehybridization）기술，이선모충신생유충（newbornlarvae,NBL）적cDNA작위시험방（tester），이기유충+성충적cDNA작위구동방（driver），제비신생유충차감cDNA；이용T재체구건NBL차감cDNA문고，획극륭주90개。이시험방적차감cDNA제2차PCR산물+미차감cDNA위시험방탐침，이구동방적차감cDNA제2차PCR산물+미차감cDNA위구동방탐침，재NBL차감cDNA문고중초사NBL적기특이성극륭，획초사극륭24개。저사초사기특이성극륭진일보용Southernblot학인감정，획진양성기특이성극륭2개（NBLSSC1,NBLSSC2）。DNASIS이급Blaster적분석결과현시，저2개극륭위선모충적2개신기인，기중NBLSSC1편마당단백，NBLSSC2편마사안산단백매。본시험위선모충기특이성기인전장서렬적조취、분석、감정이급강보호성항원기인적사선전정료기출。
