CAJ | 학술논문

背景与目的: EB病毒与鼻咽癌 (nasopharyngeal carcinoma, NPC)密切相关.可应用多种血清学方法检测鼻咽癌患者血清 EBV抗体,本研究利用鼻咽癌患者血清中纯化的 EB病毒相关多抗,从噬菌体展示的随机肽库中筛选相关的优势抗原表位,在表位水平为鼻咽癌患者血清抗体的检测寻找新的检测抗原.方法:以 B95 8细胞 EBV蛋白为抗原,从鼻咽癌患者血清中洗脱 EB病毒相关多抗,对噬菌体展示的随机 12肽库进行三轮生物淘洗.用夹心 ELISA法和竞争抑制实验筛选阳性克隆,对这些阳性克隆进行测序,并将其展示的外源多肽与 EB病毒蛋白的抗原性区域进行同源序列比对分析.结果:从第三轮的淘洗洗脱液中随机挑取 64个噬菌体克隆,用夹心 ELISA法筛选到 25个阳性克隆,阳性率为 39.06%,选取其中 13个克隆进行竞争 ELISA实验,有 11个克隆出现抑制现象,抑制率在 18.09%～ 65.94%之间.选取吸光度( A)值和抑制率均较高的 5个克隆为阳性克隆,它们所展示的外源多肽序列分别为 A T S H L H V R L P W T ( d15/d18)、 G S T H K H N H F N K T ( d19)、 K P I H E H P H R F K S ( e8)、 H T H K I K I P L P I Q ( e23).这些多肽序列分别与 EB病毒膜蛋白( d15/d18)、 EB病毒胸苷激酶( d19)、 EB病毒主要壳蛋白( e8, e23)抗原区域的氨基酸存在序列相似性.结论:利用鼻咽癌患者血清中的特异多抗可以从噬菌体展示的随机肽库中筛选到 EB病毒相关抗原表位.
배경여목적: EB병독여비인암 (nasopharyngeal carcinoma, NPC)밀절상관.가응용다충혈청학방법검측비인암환자혈청 EBV항체,본연구이용비인암환자혈청중순화적 EB병독상관다항,종서균체전시적수궤태고중사선상관적우세항원표위,재표위수평위비인암환자혈청항체적검측심조신적검측항원.방법:이 B95 8세포 EBV단백위항원,종비인암환자혈청중세탈 EB병독상관다항,대서균체전시적수궤 12태고진행삼륜생물도세.용협심 ELISA법화경쟁억제실험사선양성극륭,대저사양성극륭진행측서,병장기전시적외원다태여 EB병독단백적항원성구역진행동원서렬비대분석.결과:종제삼륜적도세세탈액중수궤도취 64개서균체극륭,용협심 ELISA법사선도 25개양성극륭,양성솔위 39.06%,선취기중 13개극륭진행경쟁 ELISA실험,유 11개극륭출현억제현상,억제솔재 18.09%～ 65.94%지간.선취흡광도( A)치화억제솔균교고적 5개극륭위양성극륭,타문소전시적외원다태서렬분별위 A T S H L H V R L P W T ( d15/d18)、 G S T H K H N H F N K T ( d19)、 K P I H E H P H R F K S ( e8)、 H T H K I K I P L P I Q ( e23).저사다태서렬분별여 EB병독막단백( d15/d18)、 EB병독흉감격매( d19)、 EB병독주요각단백( e8, e23)항원구역적안기산존재서렬상사성.결론:이용비인암환자혈청중적특이다항가이종서균체전시적수궤태고중사선도 EB병독상관항원표위.