刚地弓形虫RH株微线体蛋白MIC3成熟肽的克隆与表达
강지궁형충RH주미선체단백MIC3성숙태적극륭여표체
Cloning and expression of gene encoding the mature peptide of microneme protein MIC3 from Toxoplasma gondii RH straimn
  • 万方数据
    中国人兽共患病杂志 중국인수공환병잡지
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2005年 4期 331-334 ,共4页

    余南%何蔼%郑小英%申川军%郑斌%郑焕钦%李卓雅%曹爱莲%詹希美

    여남%하애%정소영%신천군%정빈%정환흠%리탁아%조애련%첨희미

    刚地弓形虫%微线体%克隆%表达 剛地弓形蟲%微線體%剋隆%錶達
    강지궁형충%미선체%극륭%표체
    目的克隆编码刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株微线体蛋白MIC3成熟肽的基因,构建原核表达载体pET-MMIC3,并在大肠杆菌BL21株中表达.方法采用PCR技术从刚地弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码微线体蛋白MIC3成熟肽的基因,并克隆到T载体上,经测序鉴定后,将目的基因亚克隆到表达载体pET30a(+)上,构建质粒pET-MMIC3.表达产物用Western blot进行进一步确认.结果经初步菌液PCR鉴定,提取质粒双酶切鉴定并测序,确认插入T载体的序列为所需的目的序列;亚克隆构建pET-MMIC3,转化到宿主菌大肠杆菌BL21,得到分子量为37.2kDa的重组表达蛋白,Western blot的结果与预测相符.结论成功的克隆并融合表达了刚地弓形虫RH株微线体蛋白MIC3成熟肽,为进一步研究其在弓形虫粘附和入侵中的作用奠定了基础.
    목적극륭편마강지궁형충(Toxoplasma gondii)RH주미선체단백MIC3성숙태적기인,구건원핵표체재체pET-MMIC3,병재대장간균BL21주중표체.방법채용PCR기술종강지궁형충RH주기인조DNA중확증편마미선체단백MIC3성숙태적기인,병극륭도T재체상,경측서감정후,장목적기인아극륭도표체재체pET30a(+)상,구건질립pET-MMIC3.표체산물용Western blot진행진일보학인.결과경초보균액PCR감정,제취질립쌍매절감정병측서,학인삽입T재체적서렬위소수적목적서렬;아극륭구건pET-MMIC3,전화도숙주균대장간균BL21,득도분자량위37.2kDa적중조표체단백,Western blot적결과여예측상부.결론성공적극륭병융합표체료강지궁형충RH주미선체단백MIC3성숙태,위진일보연구기재궁형충점부화입침중적작용전정료기출.
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