生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
525-529
,共5页
张大伟%楚杰%郝永任%李明华%王鹏
張大偉%楚傑%郝永任%李明華%王鵬
장대위%초걸%학영임%리명화%왕붕
几丁寡糖%N-乙酰氨基葡萄糖转移酶%重组大肠杆茵%液质联用技术
幾丁寡糖%N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶%重組大腸桿茵%液質聯用技術
궤정과당%N-을선안기포도당전이매%중조대장간인%액질련용기술
提取根瘤茵Mesorhizobium．loti 基因组,克隆编码N-乙酰氨基葡萄糖转移酶nodC基因,插入质粒pUC19的lac启动于的下游,构建并筛选出能够合成几丁寡糖的重组大肠杆茵DCL-3.利用优化的MMYNG培养基,重组大肠杆菌DCL-3在10L发酵罐中培养26h后,培养液茵体浓度测定DD560=10．8,几丁寡糖得率达到526mg／L.收集重组细菌的细胞并煮沸破碎,利用活性炭的吸附和P4凝胶层析对几丁寡糖产物进行分离纯化.纯化产物的液质分析(LC-ESI-MS)结果表明:主要寡糖产物为几丁四糖(m／z,831[M+H]+)和几丁五糖(m／z,1034[M+H]+).
提取根瘤茵Mesorhizobium．loti 基因組,剋隆編碼N-乙酰氨基葡萄糖轉移酶nodC基因,插入質粒pUC19的lac啟動于的下遊,構建併篩選齣能夠閤成幾丁寡糖的重組大腸桿茵DCL-3.利用優化的MMYNG培養基,重組大腸桿菌DCL-3在10L髮酵罐中培養26h後,培養液茵體濃度測定DD560=10．8,幾丁寡糖得率達到526mg／L.收集重組細菌的細胞併煮沸破碎,利用活性炭的吸附和P4凝膠層析對幾丁寡糖產物進行分離純化.純化產物的液質分析(LC-ESI-MS)結果錶明:主要寡糖產物為幾丁四糖(m／z,831[M+H]+)和幾丁五糖(m／z,1034[M+H]+).
제취근류인Mesorhizobium．loti 기인조,극륭편마N-을선안기포도당전이매nodC기인,삽입질립pUC19적lac계동우적하유,구건병사선출능구합성궤정과당적중조대장간인DCL-3.이용우화적MMYNG배양기,중조대장간균DCL-3재10L발효관중배양26h후,배양액인체농도측정DD560=10．8,궤정과당득솔체도526mg／L.수집중조세균적세포병자비파쇄,이용활성탄적흡부화P4응효층석대궤정과당산물진행분리순화.순화산물적액질분석(LC-ESI-MS)결과표명:주요과당산물위궤정사당(m／z,831[M+H]+)화궤정오당(m／z,1034[M+H]+).
