医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2008年
5期
387-392
,共6页
张文娟%纪卫东%杨淋清%杨建平%许玉玲%徐薇%庄志雄
張文娟%紀衛東%楊淋清%楊建平%許玉玲%徐薇%莊誌雄
장문연%기위동%양림청%양건평%허옥령%서미%장지웅
细胞衰老%组蛋白乙酰化酶%去乙酰化酶%过氧化氢
細胞衰老%組蛋白乙酰化酶%去乙酰化酶%過氧化氫
세포쇠로%조단백을선화매%거을선화매%과양화경
目的 检测人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导细胞早衰过程中组蛋白整体乙酰化修饰的改变.方法 应用细胞免疫荧光实验观察组蛋白乙酰化水平变化,并基于ELISA样反应方法检测组蛋白总体去乙酰化酶的活性变化,荧光定量PCR检测乙酰化酶mRNA表达,荧光定量PCR和Western印迹检测去乙酰化酶表达变化及曲古霉素A对相应酶表达的影响.结果 在细胞复制性衰老及细胞早衰过程中,组蛋白H3和H4整体乙酰化水平逐渐下降;去乙酰化酶活性逐渐降低;与年轻细胞组相比,中年细胞与复制性衰老细胞组P300表达下降;中年细胞组PCAF稍升高,复制性衰老细胞组降低;早衰起始组P300和PCAF均升高,早衰持续组P300降低;中年细胞组HDAC1表达稍降低;复制性衰老细胞组HDAC2稍降低;而HDAC3均降低;早衰起始组HDAC1,HDAC3有不同程度升高;早衰持续组HDAC2,HDAC3降低显著,而HDAC1明显升高.曲古霉素A诱导P300,PCAF表达,而降低HDAC1,HDAC2和HDAC3表达.结论 组蛋白H3和H4整体低乙酰化是衰老细胞的伴随状态;细胞复制性衰老与过氧化氢诱导的早衰内在调控机制存在差别.
目的 檢測人胚肺成纖維細胞複製性衰老及過氧化氫誘導細胞早衰過程中組蛋白整體乙酰化脩飾的改變.方法 應用細胞免疫熒光實驗觀察組蛋白乙酰化水平變化,併基于ELISA樣反應方法檢測組蛋白總體去乙酰化酶的活性變化,熒光定量PCR檢測乙酰化酶mRNA錶達,熒光定量PCR和Western印跡檢測去乙酰化酶錶達變化及麯古黴素A對相應酶錶達的影響.結果 在細胞複製性衰老及細胞早衰過程中,組蛋白H3和H4整體乙酰化水平逐漸下降;去乙酰化酶活性逐漸降低;與年輕細胞組相比,中年細胞與複製性衰老細胞組P300錶達下降;中年細胞組PCAF稍升高,複製性衰老細胞組降低;早衰起始組P300和PCAF均升高,早衰持續組P300降低;中年細胞組HDAC1錶達稍降低;複製性衰老細胞組HDAC2稍降低;而HDAC3均降低;早衰起始組HDAC1,HDAC3有不同程度升高;早衰持續組HDAC2,HDAC3降低顯著,而HDAC1明顯升高.麯古黴素A誘導P300,PCAF錶達,而降低HDAC1,HDAC2和HDAC3錶達.結論 組蛋白H3和H4整體低乙酰化是衰老細胞的伴隨狀態;細胞複製性衰老與過氧化氫誘導的早衰內在調控機製存在差彆.
목적 검측인배폐성섬유세포복제성쇠로급과양화경유도세포조쇠과정중조단백정체을선화수식적개변.방법 응용세포면역형광실험관찰조단백을선화수평변화,병기우ELISA양반응방법검측조단백총체거을선화매적활성변화,형광정량PCR검측을선화매mRNA표체,형광정량PCR화Western인적검측거을선화매표체변화급곡고매소A대상응매표체적영향.결과 재세포복제성쇠로급세포조쇠과정중,조단백H3화H4정체을선화수평축점하강;거을선화매활성축점강저;여년경세포조상비,중년세포여복제성쇠로세포조P300표체하강;중년세포조PCAF초승고,복제성쇠로세포조강저;조쇠기시조P300화PCAF균승고,조쇠지속조P300강저;중년세포조HDAC1표체초강저;복제성쇠로세포조HDAC2초강저;이HDAC3균강저;조쇠기시조HDAC1,HDAC3유불동정도승고;조쇠지속조HDAC2,HDAC3강저현저,이HDAC1명현승고.곡고매소A유도P300,PCAF표체,이강저HDAC1,HDAC2화HDAC3표체.결론 조단백H3화H4정체저을선화시쇠로세포적반수상태;세포복제성쇠로여과양화경유도적조쇠내재조공궤제존재차별.
