CAJ | 학술논문

在对产琥珀酸放线杆菌代谢分析的基础上选育出高产突变株对琥珀酸的工业生物转化有重要意义.在矩阵分析代谢通量基础上,围绕柔性节点下的副产物乙酸及乙醇的降低分别实施软X诱变及定点突变选育,并对比分析了突变株与出发株相关酶活及基因序列变化.针对出发株的流量分析显示产物琥珀酸的代谢通量为1.78(mmol/g/h),主要副产物乙酸与乙醇的代谢通量分别为(0.60mmol/g/h)和(1.04 mmol/g/h),并发现乙醇代谢加剧了琥珀酸合成中的H电子供体的不足;筛选出的氟乙酸抗性突变株S.JST1的乙酸代谢通量降低了96%,为0.024(mmol/g/h),酶活检测表明磷酸乙酰转移酶(Pta)的酶比活力从602降低到74,进一步的序列对比分析发现pta突变基因中产生了一个突变位点:adh定点复合突变株S.JST2的乙醇代谢通量降低了98%,为0.020(mmol/g/h),酶活检测表明Adh的酶比活力从585降低到62.最终突变株S.JST2琥珀酸累积产量达65.7 g/L.围绕产琥珀酸放线杆菌Pta及Adh酶活的降低实施定向选育,在降低副产物流量的同时,有助于改善细胞H供体代谢平衡进而提高琥珀酸的流量.所获突变株具有工业应用潜力.
재대산호박산방선간균대사분석적기출상선육출고산돌변주대호박산적공업생물전화유중요의의.재구진분석대사통량기출상,위요유성절점하적부산물을산급을순적강저분별실시연X유변급정점돌변선육,병대비분석료돌변주여출발주상관매활급기인서렬변화.침대출발주적류량분석현시산물호박산적대사통량위1.78(mmol/g/h),주요부산물을산여을순적대사통량분별위(0.60mmol/g/h)화(1.04 mmol/g/h),병발현을순대사가극료호박산합성중적H전자공체적불족;사선출적불을산항성돌변주S.JST1적을산대사통량강저료96%,위0.024(mmol/g/h),매활검측표명린산을선전이매(Pta)적매비활력종602강저도74,진일보적서렬대비분석발현pta돌변기인중산생료일개돌변위점:adh정점복합돌변주S.JST2적을순대사통량강저료98%,위0.020(mmol/g/h),매활검측표명Adh적매비활력종585강저도62.최종돌변주S.JST2호박산루적산량체65.7 g/L.위요산호박산방선간균Pta급Adh매활적강저실시정향선육,재강저부산물류량적동시,유조우개선세포H공체대사평형진이제고호박산적류량.소획돌변주구유공업응용잠력.