四川大学学报(医学版)
四川大學學報(醫學版)
사천대학학보(의학판)
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2009年
1期
106-110
,共5页
谢席胜%刘衡川%樊均明%李会娟
謝席勝%劉衡川%樊均明%李會娟
사석성%류형천%번균명%리회연
人参皂甙Rb1%氧化应激%转化生长因子-β1细胞外基质%p47phox
人參皂甙Rb1%氧化應激%轉化生長因子-β1細胞外基質%p47phox
인삼조대Rb1%양화응격%전화생장인자-β1세포외기질%p47phox
目的 探讨人参皂甙Rbl(G-Rb1)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞(NRK52E)氧化应激的作用及对细胞外基质(ECM)的影响.方法 将体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白对照组,10 ng/mL TGF-β1刺激组,不同剂量的G-Rb1干预组(在10 ng/mL TGF-β1基础上分别加入10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL G-Rb1),40 ng/mL G-Rb1组,100 nmol/L NADPH氧化酶抑制剂DPI组.采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;应用免疫组化技术、Western blot检测NADPH氧化酶亚单位p47phox的表达;实时荧光定量PCR(RT-PCR)、酶联免疫吸附法观察细胞外基质主要成分胶原I(Col-I)和纤维粘连蛋白(FN)的变化.结果 与正常对照组相比,TGF-βI可显著增强NRK52E细胞内ROS水平和p47phox的表达,ColI和FN的含量也显著增加(P<0.05).G-Rb1和DPI明显抑制了TGF-βI诱导的细胞内ROS的产生和p47phox 的表达,同时降低了Col-I和FN的水平(P<0.0S).结论 TGF-βI可以诱导NRK52E细胞ROS和p47phox水平的升高,刺激细胞外基质成分Col-I和FN的形成.G-Rb1呈剂量依赖性地抑制了TGF-βI刺激的NRKSZE细胞内的ROS水平的升高和细胞外基质的增加.其作用机制可能与降低p47phox的表达有关.
目的 探討人參皂甙Rbl(G-Rb1)對轉化生長因子-β1(TGF-β1)誘導的腎小管上皮細胞(NRK52E)氧化應激的作用及對細胞外基質(ECM)的影響.方法 將體外培養的正常大鼠腎小管上皮細胞(NRK52E)分為空白對照組,10 ng/mL TGF-β1刺激組,不同劑量的G-Rb1榦預組(在10 ng/mL TGF-β1基礎上分彆加入10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL G-Rb1),40 ng/mL G-Rb1組,100 nmol/L NADPH氧化酶抑製劑DPI組.採用流式細胞儀檢測細胞內活性氧(ROS)水平;應用免疫組化技術、Western blot檢測NADPH氧化酶亞單位p47phox的錶達;實時熒光定量PCR(RT-PCR)、酶聯免疫吸附法觀察細胞外基質主要成分膠原I(Col-I)和纖維粘連蛋白(FN)的變化.結果 與正常對照組相比,TGF-βI可顯著增彊NRK52E細胞內ROS水平和p47phox的錶達,ColI和FN的含量也顯著增加(P<0.05).G-Rb1和DPI明顯抑製瞭TGF-βI誘導的細胞內ROS的產生和p47phox 的錶達,同時降低瞭Col-I和FN的水平(P<0.0S).結論 TGF-βI可以誘導NRK52E細胞ROS和p47phox水平的升高,刺激細胞外基質成分Col-I和FN的形成.G-Rb1呈劑量依賴性地抑製瞭TGF-βI刺激的NRKSZE細胞內的ROS水平的升高和細胞外基質的增加.其作用機製可能與降低p47phox的錶達有關.
목적 탐토인삼조대Rbl(G-Rb1)대전화생장인자-β1(TGF-β1)유도적신소관상피세포(NRK52E)양화응격적작용급대세포외기질(ECM)적영향.방법 장체외배양적정상대서신소관상피세포(NRK52E)분위공백대조조,10 ng/mL TGF-β1자격조,불동제량적G-Rb1간예조(재10 ng/mL TGF-β1기출상분별가입10 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL G-Rb1),40 ng/mL G-Rb1조,100 nmol/L NADPH양화매억제제DPI조.채용류식세포의검측세포내활성양(ROS)수평;응용면역조화기술、Western blot검측NADPH양화매아단위p47phox적표체;실시형광정량PCR(RT-PCR)、매련면역흡부법관찰세포외기질주요성분효원I(Col-I)화섬유점련단백(FN)적변화.결과 여정상대조조상비,TGF-βI가현저증강NRK52E세포내ROS수평화p47phox적표체,ColI화FN적함량야현저증가(P<0.05).G-Rb1화DPI명현억제료TGF-βI유도적세포내ROS적산생화p47phox 적표체,동시강저료Col-I화FN적수평(P<0.0S).결론 TGF-βI가이유도NRK52E세포ROS화p47phox수평적승고,자격세포외기질성분Col-I화FN적형성.G-Rb1정제량의뢰성지억제료TGF-βI자격적NRKSZE세포내적ROS수평적승고화세포외기질적증가.기작용궤제가능여강저p47phox적표체유관.