医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2009年
5期
32-36,137
,共6页
宋伟%胡廷徽%陈叙%缪时英%王琳芳
宋偉%鬍廷徽%陳敘%繆時英%王琳芳
송위%호정휘%진서%무시영%왕림방
HSD-14%精子发生%精母细胞%细胞凋亡
HSD-14%精子髮生%精母細胞%細胞凋亡
HSD-14%정자발생%정모세포%세포조망
目的 研究睾丸高表达基因HSD-14及其编码蛋白质对小鼠精子发生的影响.方法 利用本实验室构建的人睾丸特异ESTs文库,通过电子克隆方法获得一新基因命名为HSD-14基因.纯化原核表达的HSD-14蛋白,并制备兔多克隆抗体.通过HE染色观察腹腔注射HSD-14纯化蛋白或睾丸曲细精管显微注射HSD-14纯化抗体后小鼠睾丸组织的生精变化,并进行TUNEL凋亡检测.结果 电子克隆获得HSD-14基因,在原核表达系统中表达成功.小鼠腹腔注射HSD-14纯化蛋白或睾丸曲细精管显微注射HSD-14纯化抗体后,均发现曲细精管中生精细胞大量脱落,生精细胞的层次紊乱,管腔内有时可见成团脱落的生精细胞,附睾中几乎观察不到成熟精子.TUNEL凋亡检测结果表明,抗体注射组小鼠曲细精管中生精细胞(以精母细胞为主)凋亡程度较正常小鼠睾丸和免疫前血清注射组明显,且多数细胞停留在精母细胞甚至精原细胞的阶段.结论 HSD-14通过诱导精母细胞凋亡抑制小鼠精子发生.
目的 研究睪汍高錶達基因HSD-14及其編碼蛋白質對小鼠精子髮生的影響.方法 利用本實驗室構建的人睪汍特異ESTs文庫,通過電子剋隆方法穫得一新基因命名為HSD-14基因.純化原覈錶達的HSD-14蛋白,併製備兔多剋隆抗體.通過HE染色觀察腹腔註射HSD-14純化蛋白或睪汍麯細精管顯微註射HSD-14純化抗體後小鼠睪汍組織的生精變化,併進行TUNEL凋亡檢測.結果 電子剋隆穫得HSD-14基因,在原覈錶達繫統中錶達成功.小鼠腹腔註射HSD-14純化蛋白或睪汍麯細精管顯微註射HSD-14純化抗體後,均髮現麯細精管中生精細胞大量脫落,生精細胞的層次紊亂,管腔內有時可見成糰脫落的生精細胞,附睪中幾乎觀察不到成熟精子.TUNEL凋亡檢測結果錶明,抗體註射組小鼠麯細精管中生精細胞(以精母細胞為主)凋亡程度較正常小鼠睪汍和免疫前血清註射組明顯,且多數細胞停留在精母細胞甚至精原細胞的階段.結論 HSD-14通過誘導精母細胞凋亡抑製小鼠精子髮生.
목적 연구고환고표체기인HSD-14급기편마단백질대소서정자발생적영향.방법 이용본실험실구건적인고환특이ESTs문고,통과전자극륭방법획득일신기인명명위HSD-14기인.순화원핵표체적HSD-14단백,병제비토다극륭항체.통과HE염색관찰복강주사HSD-14순화단백혹고환곡세정관현미주사HSD-14순화항체후소서고환조직적생정변화,병진행TUNEL조망검측.결과 전자극륭획득HSD-14기인,재원핵표체계통중표체성공.소서복강주사HSD-14순화단백혹고환곡세정관현미주사HSD-14순화항체후,균발현곡세정관중생정세포대량탈락,생정세포적층차문란,관강내유시가견성단탈락적생정세포,부고중궤호관찰불도성숙정자.TUNEL조망검측결과표명,항체주사조소서곡세정관중생정세포(이정모세포위주)조망정도교정상소서고환화면역전혈청주사조명현,차다수세포정류재정모세포심지정원세포적계단.결론 HSD-14통과유도정모세포조망억제소서정자발생.
