CAJ | 학술논문

目的:研究miRNA模拟物浓度、脂质体浓度、转染时间对人支气管上皮细胞转染效果和毒性的影响,筛选miRNA模拟物转染人支气管上皮细胞的最适宜条件.方法:分别应用0、10、30、50 nmol/L化学合成的、经Cy3标记的miRNA模拟物,以0、0.1%、0.3%、0.5%浓度的脂质体转染剂转染人支气管上皮细胞,转染6、12、24 h后应用荧光显微镜观察细胞转染情况,计算荧光强度,评价转染效果;转染24 h后,应用WST-8法检测不同转染条件对细胞活性的影响.结果:随着miRNA模拟物、脂质体浓度增加和转染时间的延长,细胞内荧光信号增强.30和50 nmol/L miRNA模拟物的转染效率明显高于10 nmol/L组(P<0.05);0.3%和0.5%脂质体组的转染效率明显高于0.1%组(P<0.05);转染24 h的荧光强度明显高于转染12 h和6 h组(P<0.05).与对照组相比,转染24 h后各转染组细胞活性无显著性变化(P>0.05).结论:人支气管上皮细胞适合应用脂质体进行化学合成miRNA模拟物的转染研究,miRNA模拟物浓度、脂质体浓度、转染时间均是转染的重要影响因素,30 nmol/L miRNA模拟物、0.3%脂质体、转染24 h可获得理想的转染效果,转染后对细胞活性无影响.
목적:연구miRNA모의물농도、지질체농도、전염시간대인지기관상피세포전염효과화독성적영향,사선miRNA모의물전염인지기관상피세포적최괄의조건.방법:분별응용0、10、30、50 nmol/L화학합성적、경Cy3표기적miRNA모의물,이0、0.1%、0.3%、0.5%농도적지질체전염제전염인지기관상피세포,전염6、12、24 h후응용형광현미경관찰세포전염정황,계산형광강도,평개전염효과;전염24 h후,응용WST-8법검측불동전염조건대세포활성적영향.결과:수착miRNA모의물、지질체농도증가화전염시간적연장,세포내형광신호증강.30화50 nmol/L miRNA모의물적전염효솔명현고우10 nmol/L조(P<0.05);0.3%화0.5%지질체조적전염효솔명현고우0.1%조(P<0.05);전염24 h적형광강도명현고우전염12 h화6 h조(P<0.05).여대조조상비,전염24 h후각전염조세포활성무현저성변화(P>0.05).결론:인지기관상피세포괄합응용지질체진행화학합성miRNA모의물적전염연구,miRNA모의물농도、지질체농도、전염시간균시전염적중요영향인소,30 nmol/L miRNA모의물、0.3%지질체、전염24 h가획득이상적전염효과,전염후대세포활성무영향.