基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
8期
948-952
,共5页
李琳%刘华%蔡红雁%郭涛
李琳%劉華%蔡紅雁%郭濤
리림%류화%채홍안%곽도
β肾上腺素能受体%信号传导%蛋白激酶Cε(PKCε)%细胞外信号调节激酶(ERK)
β腎上腺素能受體%信號傳導%蛋白激酶Cε(PKCε)%細胞外信號調節激酶(ERK)
β신상선소능수체%신호전도%단백격매Cε(PKCε)%세포외신호조절격매(ERK)
目的 研究异丙肾上腺素(Iso)刺激心肌细胞后是否激活PKCε,探讨直接被cAMP激活的交换蛋白(Epac)在其中的作用及其与ERK信号通路的关系.方法 以原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞为实验细胞,用β肾上腺素能受体(β-AR)激动剂Iso、Epac激动剂8-CPT、Epac抑制剂Epac R279K(DN)及腺病毒编码兔肌肉cAMP依赖的蛋白激酶抑制剂(Ad.PKI)和PKCε转位抑制肽处理细胞,Western blot检测细胞颗粒部分PKCε及pERK1/2,激光共聚焦显微镜观察PKCε转位情况.结果 Iso引起心肌细胞颗粒部分PKCε增加,PKCε转位于胞核周围.8-CPT增加细胞颗粒部分PKCε(P＜0.05).Epac R279K感染细胞后再予Iso处理,颗粒部分PKCε与对照组相比无增加.Ad.PKI未抑制Iso引起的颗粒部分PKCε增加(P＜0.01).PKCε转位抑制肽阻断Iso诱导的ERK1/2磷酸化.结论 心肌细胞中β-AR通过Epac介导以不依赖于PKA的方式活化PKCε并诱导ERK1/2磷酸化.
目的 研究異丙腎上腺素(Iso)刺激心肌細胞後是否激活PKCε,探討直接被cAMP激活的交換蛋白(Epac)在其中的作用及其與ERK信號通路的關繫.方法 以原代培養的Wistar乳鼠心肌細胞為實驗細胞,用β腎上腺素能受體(β-AR)激動劑Iso、Epac激動劑8-CPT、Epac抑製劑Epac R279K(DN)及腺病毒編碼兔肌肉cAMP依賴的蛋白激酶抑製劑(Ad.PKI)和PKCε轉位抑製肽處理細胞,Western blot檢測細胞顆粒部分PKCε及pERK1/2,激光共聚焦顯微鏡觀察PKCε轉位情況.結果 Iso引起心肌細胞顆粒部分PKCε增加,PKCε轉位于胞覈週圍.8-CPT增加細胞顆粒部分PKCε(P＜0.05).Epac R279K感染細胞後再予Iso處理,顆粒部分PKCε與對照組相比無增加.Ad.PKI未抑製Iso引起的顆粒部分PKCε增加(P＜0.01).PKCε轉位抑製肽阻斷Iso誘導的ERK1/2燐痠化.結論 心肌細胞中β-AR通過Epac介導以不依賴于PKA的方式活化PKCε併誘導ERK1/2燐痠化.
목적 연구이병신상선소(Iso)자격심기세포후시부격활PKCε,탐토직접피cAMP격활적교환단백(Epac)재기중적작용급기여ERK신호통로적관계.방법 이원대배양적Wistar유서심기세포위실험세포,용β신상선소능수체(β-AR)격동제Iso、Epac격동제8-CPT、Epac억제제Epac R279K(DN)급선병독편마토기육cAMP의뢰적단백격매억제제(Ad.PKI)화PKCε전위억제태처리세포,Western blot검측세포과립부분PKCε급pERK1/2,격광공취초현미경관찰PKCε전위정황.결과 Iso인기심기세포과립부분PKCε증가,PKCε전위우포핵주위.8-CPT증가세포과립부분PKCε(P＜0.05).Epac R279K감염세포후재여Iso처리,과립부분PKCε여대조조상비무증가.Ad.PKI미억제Iso인기적과립부분PKCε증가(P＜0.01).PKCε전위억제태조단Iso유도적ERK1/2린산화.결론 심기세포중β-AR통과Epac개도이불의뢰우PKA적방식활화PKCε병유도ERK1/2린산화.
