中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
27期
213-217
,共5页
申龙斌%李瑞梅%段瑞军%符少萍%郭建春
申龍斌%李瑞梅%段瑞軍%符少萍%郭建春
신룡빈%리서매%단서군%부소평%곽건춘
海马齿%金属硫蛋白%组织特异性%重金属
海馬齒%金屬硫蛋白%組織特異性%重金屬
해마치%금속류단백%조직특이성%중금속
为研究从海马齿(Sesuvium portulacastrumand L.)中克隆的Spmet基因在植株体内亚细胞水平上的分布情况及组织表达的特异性,将Spmet基因的编码区定向克隆至植物表达载体pCAMBA-1304上,使其与mgfp(绿色荧光蛋白)基因融合,构建Spmet基因植物瞬时表达载体,使用基因枪法将该表达载体导入洋葱表皮细胞,通过荧光激发,在荧光显微镜下观察洋葱表皮细胞中的绿色荧光部位,确定其在细胞中的表达部位.同时利用半定量PCR的方法对其在根、茎、叶中的表达特性进行分析.结果表明,该基因在海马齿植物的根、茎、叶中均有表达,表达量为叶＞茎＞根,融合蛋白主要分布在洋葱表皮细胞的细胞核上,细胞膜上也有微量表达.说明海马齿2型金属硫蛋白基因在海马齿植物中属于组成型表达,同时是一个核表达的基因,该结果为进一步研究Spmet基因在抗重金属方面发挥的作用打下了基础.
為研究從海馬齒(Sesuvium portulacastrumand L.)中剋隆的Spmet基因在植株體內亞細胞水平上的分佈情況及組織錶達的特異性,將Spmet基因的編碼區定嚮剋隆至植物錶達載體pCAMBA-1304上,使其與mgfp(綠色熒光蛋白)基因融閤,構建Spmet基因植物瞬時錶達載體,使用基因鎗法將該錶達載體導入洋蔥錶皮細胞,通過熒光激髮,在熒光顯微鏡下觀察洋蔥錶皮細胞中的綠色熒光部位,確定其在細胞中的錶達部位.同時利用半定量PCR的方法對其在根、莖、葉中的錶達特性進行分析.結果錶明,該基因在海馬齒植物的根、莖、葉中均有錶達,錶達量為葉＞莖＞根,融閤蛋白主要分佈在洋蔥錶皮細胞的細胞覈上,細胞膜上也有微量錶達.說明海馬齒2型金屬硫蛋白基因在海馬齒植物中屬于組成型錶達,同時是一箇覈錶達的基因,該結果為進一步研究Spmet基因在抗重金屬方麵髮揮的作用打下瞭基礎.
위연구종해마치(Sesuvium portulacastrumand L.)중극륭적Spmet기인재식주체내아세포수평상적분포정황급조직표체적특이성,장Spmet기인적편마구정향극륭지식물표체재체pCAMBA-1304상,사기여mgfp(록색형광단백)기인융합,구건Spmet기인식물순시표체재체,사용기인창법장해표체재체도입양총표피세포,통과형광격발,재형광현미경하관찰양총표피세포중적록색형광부위,학정기재세포중적표체부위.동시이용반정량PCR적방법대기재근、경、협중적표체특성진행분석.결과표명,해기인재해마치식물적근、경、협중균유표체,표체량위협＞경＞근,융합단백주요분포재양총표피세포적세포핵상,세포막상야유미량표체.설명해마치2형금속류단백기인재해마치식물중속우조성형표체,동시시일개핵표체적기인,해결과위진일보연구Spmet기인재항중금속방면발휘적작용타하료기출.
