遗传学报
遺傳學報
유전학보
ACTA GENETICA SINICA
2003年
2期
114-118
,共5页
董雅娟%柏学进%李建栋%铃木达行
董雅娟%柏學進%李建棟%鈴木達行
동아연%백학진%리건동%령목체행
牛体细胞%克隆胚胎%类ES细胞%核移植
牛體細胞%剋隆胚胎%類ES細胞%覈移植
우체세포%극륭배태%류ES세포%핵이식
对第7 d的牛体细胞克隆囊胚进行体外增殖培养,分离筛选类ES细胞,并对其进行了传代培养.接种在饲养层上的体细胞克隆囊胚细胞,在传代的24h内增殖形成小集落,2~3 d有雀巢状的集落出现,筛选形态相同的细胞集落进行传代培养,4~5代后,皿底出现多个大小不等的多细胞单层集落.将传4~5代的细胞集落接种到无饲养层的4孔培养皿中培养,24 h出现多细胞单层集落,4~7 d长满皿底,并形成上皮样细胞,呈网状,将其作为核供体细胞进行核移植实验.结果有80%(40/50)核-质融合的移核重构胚发生卵裂,5%(2/40)发育至桑椹胚期,2.5%(1/40)发育至囊胚期,92.5%(37/40)停止在2~4细胞期.结果表明:采用牛体细胞克隆胚胎的类ES细胞进行核移植,具发育形成早期胚胎的潜能.
對第7 d的牛體細胞剋隆囊胚進行體外增殖培養,分離篩選類ES細胞,併對其進行瞭傳代培養.接種在飼養層上的體細胞剋隆囊胚細胞,在傳代的24h內增殖形成小集落,2~3 d有雀巢狀的集落齣現,篩選形態相同的細胞集落進行傳代培養,4~5代後,皿底齣現多箇大小不等的多細胞單層集落.將傳4~5代的細胞集落接種到無飼養層的4孔培養皿中培養,24 h齣現多細胞單層集落,4~7 d長滿皿底,併形成上皮樣細胞,呈網狀,將其作為覈供體細胞進行覈移植實驗.結果有80%(40/50)覈-質融閤的移覈重構胚髮生卵裂,5%(2/40)髮育至桑椹胚期,2.5%(1/40)髮育至囊胚期,92.5%(37/40)停止在2~4細胞期.結果錶明:採用牛體細胞剋隆胚胎的類ES細胞進行覈移植,具髮育形成早期胚胎的潛能.
대제7 d적우체세포극륭낭배진행체외증식배양,분리사선류ES세포,병대기진행료전대배양.접충재사양층상적체세포극륭낭배세포,재전대적24h내증식형성소집락,2~3 d유작소상적집락출현,사선형태상동적세포집락진행전대배양,4~5대후,명저출현다개대소불등적다세포단층집락.장전4~5대적세포집락접충도무사양층적4공배양명중배양,24 h출현다세포단층집락,4~7 d장만명저,병형성상피양세포,정망상,장기작위핵공체세포진행핵이식실험.결과유80%(40/50)핵-질융합적이핵중구배발생란렬,5%(2/40)발육지상심배기,2.5%(1/40)발육지낭배기,92.5%(37/40)정지재2~4세포기.결과표명:채용우체세포극륭배태적류ES세포진행핵이식,구발육형성조기배태적잠능.