中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
2期
1-8
,共8页
程联胜%查昭%席甲甲%江冰%刘兢%姚雪彪
程聯勝%查昭%席甲甲%江冰%劉兢%姚雪彪
정련성%사소%석갑갑%강빙%류긍%요설표
HER2%RNA干涉%小干涉RNA%慢病毒%基因治疗
HER2%RNA榦涉%小榦涉RNA%慢病毒%基因治療
HER2%RNA간섭%소간섭RNA%만병독%기인치료
大约30%的乳腺癌中有表皮生长因子受体家族蛋白HER2的过表达,HER2表达水平与病人的预后以及恶性程度密切相关.RNA干涉(RNAi)是最近发展起来能特异性抑制哺乳动物细胞中基因表达的新技术.在以往鉴定的对HER2有良好RNAi效应的靶序列的基础上,构建了一系列U6和H1双启动子小干涉RNA(siRNA)表达载体,并转染HER2高表达乳腺癌SKBR3细胞定量测定了其HER2下调效应.随后,siRNA表达盒经LR重组反应被克隆入慢病毒载体中并成功包装成病毒.病毒感染SKBR3后经荧光定量PCR、蛋白印迹杂交和流式细胞仪一系列实验证明:慢病毒介导的RNAi确实能有效地下调肿瘤抗原HER2的表达,而且经慢病毒处理后细胞生长受到了抑制.为进一步阐明HER2与癌症恶化的关系以及发展新的基因治疗药物提供了新的工具.
大約30%的乳腺癌中有錶皮生長因子受體傢族蛋白HER2的過錶達,HER2錶達水平與病人的預後以及噁性程度密切相關.RNA榦涉(RNAi)是最近髮展起來能特異性抑製哺乳動物細胞中基因錶達的新技術.在以往鑒定的對HER2有良好RNAi效應的靶序列的基礎上,構建瞭一繫列U6和H1雙啟動子小榦涉RNA(siRNA)錶達載體,併轉染HER2高錶達乳腺癌SKBR3細胞定量測定瞭其HER2下調效應.隨後,siRNA錶達盒經LR重組反應被剋隆入慢病毒載體中併成功包裝成病毒.病毒感染SKBR3後經熒光定量PCR、蛋白印跡雜交和流式細胞儀一繫列實驗證明:慢病毒介導的RNAi確實能有效地下調腫瘤抗原HER2的錶達,而且經慢病毒處理後細胞生長受到瞭抑製.為進一步闡明HER2與癌癥噁化的關繫以及髮展新的基因治療藥物提供瞭新的工具.
대약30%적유선암중유표피생장인자수체가족단백HER2적과표체,HER2표체수평여병인적예후이급악성정도밀절상관.RNA간섭(RNAi)시최근발전기래능특이성억제포유동물세포중기인표체적신기술.재이왕감정적대HER2유량호RNAi효응적파서렬적기출상,구건료일계렬U6화H1쌍계동자소간섭RNA(siRNA)표체재체,병전염HER2고표체유선암SKBR3세포정량측정료기HER2하조효응.수후,siRNA표체합경LR중조반응피극륭입만병독재체중병성공포장성병독.병독감염SKBR3후경형광정량PCR、단백인적잡교화류식세포의일계렬실험증명:만병독개도적RNAi학실능유효지하조종류항원HER2적표체,이차경만병독처리후세포생장수도료억제.위진일보천명HER2여암증악화적관계이급발전신적기인치료약물제공료신적공구.
