中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2005年
2期
114-116
,共3页
人TRAIL%基因克隆%包涵体%复性
人TRAIL%基因剋隆%包涵體%複性
인TRAIL%기인극륭%포함체%복성
目的在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)基因,并研究其包涵体的复性.方法应用RT-PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因,将其克隆到原核表达载体pBV220,于大肠杆菌DH5α中通过温控诱导表达;将包涵体进行变性和复性处理后,采用离子交换层析纯化表达产物,并经Dot blot及MIT试验鉴定.结果通过温度诱导,目的基因主要以包涵体形式高效表达,包涵体蛋白经梯度透析法复性可获得具有抗肿瘤活性的重组人sTRAIL.结论已获得大量纯化重组人sTRAIL,为开发新型抗肿瘤制剂奠定基础.
目的在大腸桿菌中錶達人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體細胞外段(sTRAIL)基因,併研究其包涵體的複性.方法應用RT-PCR法從正常人外週血單覈細胞中穫得sTRAIL的編碼基因,將其剋隆到原覈錶達載體pBV220,于大腸桿菌DH5α中通過溫控誘導錶達;將包涵體進行變性和複性處理後,採用離子交換層析純化錶達產物,併經Dot blot及MIT試驗鑒定.結果通過溫度誘導,目的基因主要以包涵體形式高效錶達,包涵體蛋白經梯度透析法複性可穫得具有抗腫瘤活性的重組人sTRAIL.結論已穫得大量純化重組人sTRAIL,為開髮新型抗腫瘤製劑奠定基礎.
목적재대장간균중표체인종류배사인자상관조망유도배체세포외단(sTRAIL)기인,병연구기포함체적복성.방법응용RT-PCR법종정상인외주혈단핵세포중획득sTRAIL적편마기인,장기극륭도원핵표체재체pBV220,우대장간균DH5α중통과온공유도표체;장포함체진행변성화복성처리후,채용리자교환층석순화표체산물,병경Dot blot급MIT시험감정.결과통과온도유도,목적기인주요이포함체형식고효표체,포함체단백경제도투석법복성가획득구유항종류활성적중조인sTRAIL.결론이획득대량순화중조인sTRAIL,위개발신형항종류제제전정기출.
