CAJ | 학술논문

目的:研究外源性PTEN基因稳定转染对人卵巢癌A2780细胞周期和增殖能力的影响.方法:构建PTEN基因的野生型真核表达质粒pEGFP-C1-WT-PTEN和突变型表达质粒pEG-FP-C1-C124A PTEN,以脂质体介导法转染体外培养的人卵巢癌细胞株A2780,同时转染空载体pEGFP C1质粒,以未转染细胞为对照(转染成功后分别命名为WT-PTEN/A2780组、C1 24A-PTEN/A2780组、pEGFP-C1/A2-780组和A2780组.应用RT-PCR、Western blot方法分析目的基因及其蛋白表达,并采用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期.结果:与对照细胞相比,WT-PTEN/A2780组和C124A-PTEN/A2780组PTEN mRNA及PTEN蛋白出现明显的高表达,与对照组细胞相比差异有统计学意义(t=5.300,P=0.034;t=11.963,P=0.007;t=7.869,P=0.01 6;t=22.421,P=0.002);WT-PTEN/A2780组细胞生长速度明显慢于未转染A2780细胞,然而C124A-PTEN/A2780组和pEGFP-C1/A2780组细胞生长速度无明显变化.流式细胞术显示WT-PTEN/A2780细胞G1期细胞数增加到(71.18±4.34)%,S期细胞数变为(17.48±1.96)%,与对照组相比差异有统计学意义(t=19.508,P=0.003;t=25.354,P=0.002),提示从G1期到S期发生抑制.结论:野生型PTEN可依赖其磷酸酶活性使A2780细胞在G1/S期发生细胞周期阻滞,并抑制A2780细胞增殖.
목적:연구외원성PTEN기인은정전염대인란소암A2780세포주기화증식능력적영향.방법:구건PTEN기인적야생형진핵표체질립pEGFP-C1-WT-PTEN화돌변형표체질립pEG-FP-C1-C124A PTEN,이지질체개도법전염체외배양적인란소암세포주A2780,동시전염공재체pEGFP C1질립,이미전염세포위대조(전염성공후분별명명위WT-PTEN/A2780조、C1 24A-PTEN/A2780조、pEGFP-C1/A2-780조화A2780조.응용RT-PCR、Western blot방법분석목적기인급기단백표체,병채용MTT법화류식세포술검측세포증식화세포주기.결과:여대조세포상비,WT-PTEN/A2780조화C124A-PTEN/A2780조PTEN mRNA급PTEN단백출현명현적고표체,여대조조세포상비차이유통계학의의(t=5.300,P=0.034;t=11.963,P=0.007;t=7.869,P=0.01 6;t=22.421,P=0.002);WT-PTEN/A2780조세포생장속도명현만우미전염A2780세포,연이C124A-PTEN/A2780조화pEGFP-C1/A2780조세포생장속도무명현변화.류식세포술현시WT-PTEN/A2780세포G1기세포수증가도(71.18±4.34)%,S기세포수변위(17.48±1.96)%,여대조조상비차이유통계학의의(t=19.508,P=0.003;t=25.354,P=0.002),제시종G1기도S기발생억제.결론:야생형PTEN가의뢰기린산매활성사A2780세포재G1/S기발생세포주기조체,병억제A2780세포증식.