动物学研究
動物學研究
동물학연구
ZOOLOGICAL RESEARCH
2008年
4期
405-414
,共10页
张敬%魏强%卢斌%陈永昌%陈洪伟%李荣荣%王喜宏%季维智
張敬%魏彊%盧斌%陳永昌%陳洪偉%李榮榮%王喜宏%季維智
장경%위강%로빈%진영창%진홍위%리영영%왕희굉%계유지
猕猴%FGF2%饲养层%胚胎干细胞%增殖
獼猴%FGF2%飼養層%胚胎榦細胞%增殖
미후%FGF2%사양층%배태간세포%증식
用转基因和RNA干扰(RNAi)法建立5组不同成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF2)表达量的猕猴耳部皮肤成纤维细胞(MESF)系:过表达FGF2组(f1),过表达的阴性对照组(f2),FGF2 RNA干扰组(f3),RNA干扰的阴性对照组(f4)和未作任何处理的对照组(f5).5组MESF的FGF2表达量相对值为f1:f2:f3:f4:f5=4:2:1:2:2;c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl在f1中表达量上升,在f3中表达量下降;BMP4,TGF-β2在f1中表达量下降,在f3中表达量上升;表明内源FGF2能够作用于MESF的TGF-β信号通路,引起相关基因表达量的变化.用这砦细胞作为饲养层长期培养(10代)猕猴胚胎干细胞(RhESC),结果在f1上培养的RhESC增殖速度都比对照组快,并且c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2表达量均上升,BMP4表达下调;在f3上培养的RhESC增殖较慢,BMP4表达上调,c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2表达下调.5组MESF上培养的RhESC形成的EB均表达各胚层早期标记基因(marker),说明RhESC的多能性没有受到影响,但表达量有差异,f1上RhESC形成的EB所有marker都低表达.结果表明饲养层的FGF2含量不仅影响自身相关基凶的表达,还对RhESC的自我更新有一定的作用.
用轉基因和RNA榦擾(RNAi)法建立5組不同成纖維細胞生長因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF2)錶達量的獼猴耳部皮膚成纖維細胞(MESF)繫:過錶達FGF2組(f1),過錶達的陰性對照組(f2),FGF2 RNA榦擾組(f3),RNA榦擾的陰性對照組(f4)和未作任何處理的對照組(f5).5組MESF的FGF2錶達量相對值為f1:f2:f3:f4:f5=4:2:1:2:2;c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl在f1中錶達量上升,在f3中錶達量下降;BMP4,TGF-β2在f1中錶達量下降,在f3中錶達量上升;錶明內源FGF2能夠作用于MESF的TGF-β信號通路,引起相關基因錶達量的變化.用這砦細胞作為飼養層長期培養(10代)獼猴胚胎榦細胞(RhESC),結果在f1上培養的RhESC增殖速度都比對照組快,併且c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2錶達量均上升,BMP4錶達下調;在f3上培養的RhESC增殖較慢,BMP4錶達上調,c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2錶達下調.5組MESF上培養的RhESC形成的EB均錶達各胚層早期標記基因(marker),說明RhESC的多能性沒有受到影響,但錶達量有差異,f1上RhESC形成的EB所有marker都低錶達.結果錶明飼養層的FGF2含量不僅影響自身相關基兇的錶達,還對RhESC的自我更新有一定的作用.
용전기인화RNA간우(RNAi)법건립5조불동성섬유세포생장인자-2(fibroblast growth factor-2,FGF2)표체량적미후이부피부성섬유세포(MESF)계:과표체FGF2조(f1),과표체적음성대조조(f2),FGF2 RNA간우조(f3),RNA간우적음성대조조(f4)화미작임하처리적대조조(f5).5조MESF적FGF2표체량상대치위f1:f2:f3:f4:f5=4:2:1:2:2;c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl재f1중표체량상승,재f3중표체량하강;BMP4,TGF-β2재f1중표체량하강,재f3중표체량상승;표명내원FGF2능구작용우MESF적TGF-β신호통로,인기상관기인표체량적변화.용저채세포작위사양층장기배양(10대)미후배태간세포(RhESC),결과재f1상배양적RhESC증식속도도비대조조쾌,병차c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2표체량균상승,BMP4표체하조;재f3상배양적RhESC증식교만,BMP4표체상조,c-fos,TGF-β1,INHBA,Gremlinl,Oct-4,Nanog,Sox2표체하조.5조MESF상배양적RhESC형성적EB균표체각배층조기표기기인(marker),설명RhESC적다능성몰유수도영향,단표체량유차이,f1상RhESC형성적EB소유marker도저표체.결과표명사양층적FGF2함량불부영향자신상관기흉적표체,환대RhESC적자아경신유일정적작용.
