CAJ | 학술논문

目的:研究黄芩苷对人淋巴细胞Toll样受体(TLR)的调节,探讨其在免疫调节方面的作用.方法:1.尼龙毛分离法分离人外周血T和B细胞后使用UF-50流式分析寻找最佳黄芩苷作用浓度;2.采用实时定量荧光RT-PCR,分析在最佳黄芩苷作用浓度处理前后TLRs的表达情况;3.通过加入鼠抗人TLR4单抗进行受体抑制实验并应用实时定量荧光RT-PCR探讨黄芩苷对TLRs的调节位点.结果:1.1 mg/ml的黄芩苷在体外可以显著促进人T、B淋巴细胞增殖(P<0.05);2.使用1 mg/ml黄芩苷相对于未用黄芩苷处理的T、B细胞,其TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达均有显著增加(P<0.05),T细胞增加倍数分别为21、15、57和66倍,B细胞增加的倍数分别为24、20、61和63倍,而TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6及TLR10 mRNAs表达变化不显著(P>0.05);3.在1 mg/ml黄芩苷作用下人T、B细胞TLR3、7、8和9 mRNA在12小时时表达已开始增加,除T细胞的TLR7 mRNA表达在48小时时略有下降外,其余表达基本一直持续增加,至48小时到达峰值;4.人T、B细胞在被黄芩苷作用前使用鼠抗人TLR4单克隆抗体封闭,会显著降低黄芩苷对TLR3、7、8和9 mRNA表达的诱导作用(P<0.05),T细胞下降比率分别为47.6%、66 7%、50.9%和45.5%;B细胞下降比率分别为50.0%、45.0%、50.8%和50.8%.结论:1.黄芩苷在体外能显著促进T、B淋巴细胞增殖;2.人外周血T、B细胞组成性表达含量差异较大的TLR1-10 mRNA,黄芩苷在体外可以显著上调人T、B淋巴细胞TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNAs的表达,但对TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6及TLR10 mRNAs未见明显影响;3.黄芩苷可能通过TLR4发挥对人天然免疫能力的调节.
목적:연구황금감대인림파세포Toll양수체(TLR)적조절,탐토기재면역조절방면적작용.방법:1.니룡모분리법분리인외주혈T화B세포후사용UF-50류식분석심조최가황금감작용농도;2.채용실시정량형광RT-PCR,분석재최가황금감작용농도처리전후TLRs적표체정황;3.통과가입서항인TLR4단항진행수체억제실험병응용실시정량형광RT-PCR탐토황금감대TLRs적조절위점.결과:1.1 mg/ml적황금감재체외가이현저촉진인T、B림파세포증식(P<0.05);2.사용1 mg/ml황금감상대우미용황금감처리적T、B세포,기TLR3、TLR7、TLR8급TLR9 mRNA적표체균유현저증가(P<0.05),T세포증가배수분별위21、15、57화66배,B세포증가적배수분별위24、20、61화63배,이TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6급TLR10 mRNAs표체변화불현저(P>0.05);3.재1 mg/ml황금감작용하인T、B세포TLR3、7、8화9 mRNA재12소시시표체이개시증가,제T세포적TLR7 mRNA표체재48소시시략유하강외,기여표체기본일직지속증가,지48소시도체봉치;4.인T、B세포재피황금감작용전사용서항인TLR4단극륭항체봉폐,회현저강저황금감대TLR3、7、8화9 mRNA표체적유도작용(P<0.05),T세포하강비솔분별위47.6%、66 7%、50.9%화45.5%;B세포하강비솔분별위50.0%、45.0%、50.8%화50.8%.결론:1.황금감재체외능현저촉진T、B림파세포증식;2.인외주혈T、B세포조성성표체함량차이교대적TLR1-10 mRNA,황금감재체외가이현저상조인T、B림파세포TLR3、TLR7、TLR8급TLR9 mRNAs적표체,단대TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6급TLR10 mRNAs미견명현영향;3.황금감가능통과TLR4발휘대인천연면역능력적조절.