浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2012年
4期
630-636
,共7页
张为宏%朱廷恒%汪琨%崔志峰
張為宏%硃廷恆%汪琨%崔誌峰
장위굉%주정항%왕곤%최지봉
灰葡萄孢%细胞壁缺陷%T-DNA插入突变体%TAIL-PCR
灰葡萄孢%細胞壁缺陷%T-DNA插入突變體%TAIL-PCR
회포도포%세포벽결함%T-DNA삽입돌변체%TAIL-PCR
为探明灰葡萄孢细胞壁相关基因功能,用荧光增白剂Calcofluor White (CFW)从灰葡萄孢T-DNA插入突变体库中筛选细胞壁完整性缺陷突变株,发现一株突变株D-59对CFW的敏感性与野生型相比提高了2.8倍.通过TAIL-PCR扩增突变株的T-DNA插入位点的侧翼序列并对其进行序列分析表明,T-DNA插入于突变株BC1G_ 00770.1基因的外显子部位.RT-PCR的结果显示,D-59的BC1G_00770.1基因不表达.突变株D-59的表型分析表明,突变株的菌丝稀疏,菌落呈土黄色,产孢量明显下降,孢子萌发异常,致病能力减弱,细胞壁的几丁质含量下降了48％.
為探明灰葡萄孢細胞壁相關基因功能,用熒光增白劑Calcofluor White (CFW)從灰葡萄孢T-DNA插入突變體庫中篩選細胞壁完整性缺陷突變株,髮現一株突變株D-59對CFW的敏感性與野生型相比提高瞭2.8倍.通過TAIL-PCR擴增突變株的T-DNA插入位點的側翼序列併對其進行序列分析錶明,T-DNA插入于突變株BC1G_ 00770.1基因的外顯子部位.RT-PCR的結果顯示,D-59的BC1G_00770.1基因不錶達.突變株D-59的錶型分析錶明,突變株的菌絲稀疏,菌落呈土黃色,產孢量明顯下降,孢子萌髮異常,緻病能力減弱,細胞壁的幾丁質含量下降瞭48％.
위탐명회포도포세포벽상관기인공능,용형광증백제Calcofluor White (CFW)종회포도포T-DNA삽입돌변체고중사선세포벽완정성결함돌변주,발현일주돌변주D-59대CFW적민감성여야생형상비제고료2.8배.통과TAIL-PCR확증돌변주적T-DNA삽입위점적측익서렬병대기진행서렬분석표명,T-DNA삽입우돌변주BC1G_ 00770.1기인적외현자부위.RT-PCR적결과현시,D-59적BC1G_00770.1기인불표체.돌변주D-59적표형분석표명,돌변주적균사희소,균락정토황색,산포량명현하강,포자맹발이상,치병능력감약,세포벽적궤정질함량하강료48％.
