实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2009年
8期
618-621
,共4页
蔡馥丞%黄亚玲%熊念%鲁娜%钟严艳%王涛
蔡馥丞%黃亞玲%熊唸%魯娜%鐘嚴豔%王濤
채복승%황아령%웅념%로나%종엄염%왕도
脐带%间充质干细胞%缺氧缺血性脑病%大鼠
臍帶%間充質榦細胞%缺氧缺血性腦病%大鼠
제대%간충질간세포%결양결혈성뇌병%대서
目的 观察脐带间充质干细胞(UCMSCs)植入HIE大鼠模型仔鼠后存活、增殖及分化情况.方法 取人脐带组织,经胶原酶和胰蛋白酶消化后,分离UCMSCs,采用5-溴脱氧尿苷(BrdU)标记.将孕鼠随机分为实验组(n=6)和对照组(n=1).实验组结扎孕鼠子宫动脉15 min,建立宫内全脑缺氧缺血损伤模型,幼鼠出生20 d(P20)随机分为干细胞组(n=24)和PBS组(n=19).干细胞组仔鼠小脑延髓池穿刺注射UCMSCs,PBS组注射PBS.移植后1、2、3、4周,采用免疫组织化学方法检测其BrdU、巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)表达,以硫堇染色观察其神经元形态.对照组正常分娩,同样检测作同期对照.结果 干细胞组于移植后1周海马齿状回即出现BrdU、Nestin、NSE和GFAP阳性细胞;BrdU和Nestin阳性细胞于移植1~3周逐渐增高,组间两两比较具有统计学意义(Pa<0.01),移植3~4周阳性细胞数目无明显差异(P>0.05);NSE和GFAP阳性细胞于1~4周均渐增加,组间两两比较具有统计学意义(Pa<0.01).硫堇染色观察其海马细胞形态,对照组神经细胞排列整齐,神经元呈多形性,数目多;PBS组神经细胞排列紊乱,神经元数目减少;干细胞组细胞排列较整齐,神经元数目较多.结论 UCMSCs经小脑延髓池移植至HIE大鼠模型能存活,并分化为神经干细胞、神经元及星形胶质细胞.
目的 觀察臍帶間充質榦細胞(UCMSCs)植入HIE大鼠模型仔鼠後存活、增殖及分化情況.方法 取人臍帶組織,經膠原酶和胰蛋白酶消化後,分離UCMSCs,採用5-溴脫氧尿苷(BrdU)標記.將孕鼠隨機分為實驗組(n=6)和對照組(n=1).實驗組結扎孕鼠子宮動脈15 min,建立宮內全腦缺氧缺血損傷模型,幼鼠齣生20 d(P20)隨機分為榦細胞組(n=24)和PBS組(n=19).榦細胞組仔鼠小腦延髓池穿刺註射UCMSCs,PBS組註射PBS.移植後1、2、3、4週,採用免疫組織化學方法檢測其BrdU、巢蛋白(Nestin)、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、膠原纖維痠性蛋白(GFAP)錶達,以硫堇染色觀察其神經元形態.對照組正常分娩,同樣檢測作同期對照.結果 榦細胞組于移植後1週海馬齒狀迴即齣現BrdU、Nestin、NSE和GFAP暘性細胞;BrdU和Nestin暘性細胞于移植1~3週逐漸增高,組間兩兩比較具有統計學意義(Pa<0.01),移植3~4週暘性細胞數目無明顯差異(P>0.05);NSE和GFAP暘性細胞于1~4週均漸增加,組間兩兩比較具有統計學意義(Pa<0.01).硫堇染色觀察其海馬細胞形態,對照組神經細胞排列整齊,神經元呈多形性,數目多;PBS組神經細胞排列紊亂,神經元數目減少;榦細胞組細胞排列較整齊,神經元數目較多.結論 UCMSCs經小腦延髓池移植至HIE大鼠模型能存活,併分化為神經榦細胞、神經元及星形膠質細胞.
목적 관찰제대간충질간세포(UCMSCs)식입HIE대서모형자서후존활、증식급분화정황.방법 취인제대조직,경효원매화이단백매소화후,분리UCMSCs,채용5-추탈양뇨감(BrdU)표기.장잉서수궤분위실험조(n=6)화대조조(n=1).실험조결찰잉서자궁동맥15 min,건립궁내전뇌결양결혈손상모형,유서출생20 d(P20)수궤분위간세포조(n=24)화PBS조(n=19).간세포조자서소뇌연수지천자주사UCMSCs,PBS조주사PBS.이식후1、2、3、4주,채용면역조직화학방법검측기BrdU、소단백(Nestin)、신경원특이성희순화매(NSE)、효원섬유산성단백(GFAP)표체,이류근염색관찰기신경원형태.대조조정상분면,동양검측작동기대조.결과 간세포조우이식후1주해마치상회즉출현BrdU、Nestin、NSE화GFAP양성세포;BrdU화Nestin양성세포우이식1~3주축점증고,조간량량비교구유통계학의의(Pa<0.01),이식3~4주양성세포수목무명현차이(P>0.05);NSE화GFAP양성세포우1~4주균점증가,조간량량비교구유통계학의의(Pa<0.01).류근염색관찰기해마세포형태,대조조신경세포배렬정제,신경원정다형성,수목다;PBS조신경세포배렬문란,신경원수목감소;간세포조세포배렬교정제,신경원수목교다.결론 UCMSCs경소뇌연수지이식지HIE대서모형능존활,병분화위신경간세포、신경원급성형효질세포.