苏州大学学报(工科版)
囌州大學學報(工科版)
소주대학학보(공과판)
JOURNAL OF SOOCHOW UNIVERSITY（ENGINEERING SCIENCE EDITION）
2003年
2期
10-16
,共7页
季平%查新民%张国英%沈卫德
季平%查新民%張國英%瀋衛德
계평%사신민%장국영%침위덕
昆虫表达系统%蛋白酶抑制剂%信号肽%分泌表达
昆蟲錶達繫統%蛋白酶抑製劑%信號肽%分泌錶達
곤충표체계통%단백매억제제%신호태%분비표체
将杆状病来源的gp67信号肽引导的慈姑蛋白酶抑制剂(API)基因与植物来源的慈姑蛋白酶抑制剂信号肽引导的慈姑蛋白抑制剂(API)基因,分别克隆到昆虫杆状病毒转载体pBacPAK8中,通过共转染将它们分别整合到昆虫病毒表达载体Bm-BacPAK6中,将获得的重组病毒CrBK-API2和CrBK-bpAPI4分别接种家蚕(Bombyx mori)细胞、家蚕幼虫及蛹体中,慈姑蛋白酶抑制剂得到了高效表达.从家蚕细胞的表达来看,外源表达产物大多存在于细胞外的上清液中;从家蚕幼虫体内表达来看,信号肽能引导外源基因高效表达,且表达产物的90%以上能分泌到细胞外;蛹体中的表达情况与幼虫中的相似,但表达产物出了不均一的现象,从表达产物的分子量测定来看,这两种信号肽在表达过程中都没有被切除.
將桿狀病來源的gp67信號肽引導的慈姑蛋白酶抑製劑(API)基因與植物來源的慈姑蛋白酶抑製劑信號肽引導的慈姑蛋白抑製劑(API)基因,分彆剋隆到昆蟲桿狀病毒轉載體pBacPAK8中,通過共轉染將它們分彆整閤到昆蟲病毒錶達載體Bm-BacPAK6中,將穫得的重組病毒CrBK-API2和CrBK-bpAPI4分彆接種傢蠶(Bombyx mori)細胞、傢蠶幼蟲及蛹體中,慈姑蛋白酶抑製劑得到瞭高效錶達.從傢蠶細胞的錶達來看,外源錶達產物大多存在于細胞外的上清液中;從傢蠶幼蟲體內錶達來看,信號肽能引導外源基因高效錶達,且錶達產物的90%以上能分泌到細胞外;蛹體中的錶達情況與幼蟲中的相似,但錶達產物齣瞭不均一的現象,從錶達產物的分子量測定來看,這兩種信號肽在錶達過程中都沒有被切除.
장간상병래원적gp67신호태인도적자고단백매억제제(API)기인여식물래원적자고단백매억제제신호태인도적자고단백억제제(API)기인,분별극륭도곤충간상병독전재체pBacPAK8중,통과공전염장타문분별정합도곤충병독표체재체Bm-BacPAK6중,장획득적중조병독CrBK-API2화CrBK-bpAPI4분별접충가잠(Bombyx mori)세포、가잠유충급용체중,자고단백매억제제득도료고효표체.종가잠세포적표체래간,외원표체산물대다존재우세포외적상청액중;종가잠유충체내표체래간,신호태능인도외원기인고효표체,차표체산물적90%이상능분비도세포외;용체중적표체정황여유충중적상사,단표체산물출료불균일적현상,종표체산물적분자량측정래간,저량충신호태재표체과정중도몰유피절제.
