口腔医学研究
口腔醫學研究
구강의학연구
JOURNAL OF ORAL SCIENCE RESEARCH
2004年
4期
340-342
,共3页
变形链球菌%葡聚糖结合蛋白B%基因表达%蛋白纯化
變形鏈毬菌%葡聚糖結閤蛋白B%基因錶達%蛋白純化
변형련구균%포취당결합단백B%기인표체%단백순화
目的:在大肠杆菌中表达变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因(glucan binding protein B,gbpB),并对重组蛋白进行初步纯化,为下一步制备多抗和进行相关的研究奠定基础.方法:将克隆到的gbpB全长编码区基因克隆到表达载体pPROEXTMHTb,构建表达质粒pPROEXTMHTb-gbpB,以大肠杆菌E. coli BL21(DE3)为宿主菌进行诱导表达,表达产物经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱进行亲和层析纯化.结果:工程菌经IPTG诱导3 h后,在SDS-PAGE上出现一条新的蛋白条带,相对分子量(Mr)为4.5～5.0×103,以可溶形式存在,经Ni-NTA柱纯化后获得纯度较高的重组葡聚糖结合蛋白B.结论:获得Mr为4.5～5.0×103的重组葡聚糖结合蛋白B.
目的:在大腸桿菌中錶達變形鏈毬菌葡聚糖結閤蛋白B基因(glucan binding protein B,gbpB),併對重組蛋白進行初步純化,為下一步製備多抗和進行相關的研究奠定基礎.方法:將剋隆到的gbpB全長編碼區基因剋隆到錶達載體pPROEXTMHTb,構建錶達質粒pPROEXTMHTb-gbpB,以大腸桿菌E. coli BL21(DE3)為宿主菌進行誘導錶達,錶達產物經鎳-次氮基三乙痠(Ni-NTA)柱進行親和層析純化.結果:工程菌經IPTG誘導3 h後,在SDS-PAGE上齣現一條新的蛋白條帶,相對分子量(Mr)為4.5～5.0×103,以可溶形式存在,經Ni-NTA柱純化後穫得純度較高的重組葡聚糖結閤蛋白B.結論:穫得Mr為4.5～5.0×103的重組葡聚糖結閤蛋白B.
목적:재대장간균중표체변형련구균포취당결합단백B기인(glucan binding protein B,gbpB),병대중조단백진행초보순화,위하일보제비다항화진행상관적연구전정기출.방법:장극륭도적gbpB전장편마구기인극륭도표체재체pPROEXTMHTb,구건표체질립pPROEXTMHTb-gbpB,이대장간균E. coli BL21(DE3)위숙주균진행유도표체,표체산물경얼-차담기삼을산(Ni-NTA)주진행친화층석순화.결과:공정균경IPTG유도3 h후,재SDS-PAGE상출현일조신적단백조대,상대분자량(Mr)위4.5～5.0×103,이가용형식존재,경Ni-NTA주순화후획득순도교고적중조포취당결합단백B.결론:획득Mr위4.5～5.0×103적중조포취당결합단백B.
