CAJ | 학술논문

目的研究晚期糖基化终末产物(AGE)与糖尿病(DM)皮肤微血管病变的关系,探讨DM创面新生血管化障碍或延迟的机制.方法应用链脲佐菌素(STZ)将SD大鼠诱导成速发型DM大鼠模型,并以正常SD大鼠作为对照,于致病后12周获取大鼠背部中央的皮肤标本.应用F-3010荧光分光光度计和免疫组织化学技术测定皮肤中AGE含量的变化;应用透射电镜观察皮肤微血管超微结构的改变.再选用人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞与不同浓度的AGE修饰人血清白蛋白(AGE-HSA)在体外共同培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测AGE对人血管内皮细胞活性的的影响.结果 DM大鼠皮肤胶原提取液的荧光值明显高于相应年龄的正常大鼠(P<0.01);免疫组织化学检测显示DM大鼠皮肤中AGE呈片状或块状沉积,其表达阳性率和强阳性率显著高于正常大鼠(P<0.01);DM大鼠皮肤普遍存在微血管病变,主要表现为血管内皮细胞变性和基底膜增厚;内皮细胞经100 μg/ml AGE-HSA干预6 h后,采用MTT法测定其吸光度值显著低于正常大鼠(P<0.01),流式细胞仪测定的各时相点凋亡细胞百分率亦明显高于正常大鼠(P<0.01),且均呈时间和剂量的依赖性.结论 AGE是DM皮肤微血管病变的重要致病因素,亦是DM合并创伤后新生血管化障碍或延迟的病理基础.
목적연구만기당기화종말산물(AGE)여당뇨병(DM)피부미혈관병변적관계,탐토DM창면신생혈관화장애혹연지적궤제.방법응용련뇨좌균소(STZ)장SD대서유도성속발형DM대서모형,병이정상SD대서작위대조,우치병후12주획취대서배부중앙적피부표본.응용F-3010형광분광광도계화면역조직화학기술측정피부중AGE함량적변화;응용투사전경관찰피부미혈관초미결구적개변.재선용인제정맥내피세포주ECV304세포여불동농도적AGE수식인혈청백단백(AGE-HSA)재체외공동배양,채용사갑기우담서람(MTT)비색법화류식세포의검측AGE대인혈관내피세포활성적적영향.결과 DM대서피부효원제취액적형광치명현고우상응년령적정상대서(P<0.01);면역조직화학검측현시DM대서피부중AGE정편상혹괴상침적,기표체양성솔화강양성솔현저고우정상대서(P<0.01);DM대서피부보편존재미혈관병변,주요표현위혈관내피세포변성화기저막증후;내피세포경100 μg/ml AGE-HSA간예6 h후,채용MTT법측정기흡광도치현저저우정상대서(P<0.01),류식세포의측정적각시상점조망세포백분솔역명현고우정상대서(P<0.01),차균정시간화제량적의뢰성.결론 AGE시DM피부미혈관병변적중요치병인소,역시DM합병창상후신생혈관화장애혹연지적병리기출.