热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2010年
6期
965-971
,共7页
郭莺%阮妙鸿%吴杨%刘佳%杨川毓%张木清
郭鶯%阮妙鴻%吳楊%劉佳%楊川毓%張木清
곽앵%원묘홍%오양%류가%양천육%장목청
RNA沉默%RNA沉默抑制子%HC-Pro%共转化%PMI
RNA沉默%RNA沉默抑製子%HC-Pro%共轉化%PMI
RNA침묵%RNA침묵억제자%HC-Pro%공전화%PMI
通过基因枪(PDS-1000He)轰击法将构建好的多功能蛋白HC-Pro的植物表达载体pHCFL与带PMI筛选标记基因的pZMLR14植物表达载体共转化导入易感花叶病甘蔗品种福农95-1702的胚性愈伤组织中,转化的愈伤经甘露糖筛选后获得抗性转化甘蔗幼苗.经PCR检测、氯酚红显色、RT-PCR检测和DNA点杂交分析获得转HC-Pro的转基因植株,转化率为0.8%(HC-Pro基因)、1.7%(PMI基因)和0.4%(HC-Pro基因+PMI基因).花叶病毒接种实验结果显示,未转基因植株的发病率为75%,而转基因植株均系统性发病,推测由于HC-Pro的大量表达抑制了甘蔗体内自身的RNA沉默机制而使病情加重.其它农艺性状调查结果显示,转基因与未转基因植株之间不存在显著差异,表明转HC-Pro和PMI基因对甘蔗的生长或其他农艺性状没有负面影响.
通過基因鎗(PDS-1000He)轟擊法將構建好的多功能蛋白HC-Pro的植物錶達載體pHCFL與帶PMI篩選標記基因的pZMLR14植物錶達載體共轉化導入易感花葉病甘蔗品種福農95-1702的胚性愈傷組織中,轉化的愈傷經甘露糖篩選後穫得抗性轉化甘蔗幼苗.經PCR檢測、氯酚紅顯色、RT-PCR檢測和DNA點雜交分析穫得轉HC-Pro的轉基因植株,轉化率為0.8%(HC-Pro基因)、1.7%(PMI基因)和0.4%(HC-Pro基因+PMI基因).花葉病毒接種實驗結果顯示,未轉基因植株的髮病率為75%,而轉基因植株均繫統性髮病,推測由于HC-Pro的大量錶達抑製瞭甘蔗體內自身的RNA沉默機製而使病情加重.其它農藝性狀調查結果顯示,轉基因與未轉基因植株之間不存在顯著差異,錶明轉HC-Pro和PMI基因對甘蔗的生長或其他農藝性狀沒有負麵影響.
통과기인창(PDS-1000He)굉격법장구건호적다공능단백HC-Pro적식물표체재체pHCFL여대PMI사선표기기인적pZMLR14식물표체재체공전화도입역감화협병감자품충복농95-1702적배성유상조직중,전화적유상경감로당사선후획득항성전화감자유묘.경PCR검측、록분홍현색、RT-PCR검측화DNA점잡교분석획득전HC-Pro적전기인식주,전화솔위0.8%(HC-Pro기인)、1.7%(PMI기인)화0.4%(HC-Pro기인+PMI기인).화협병독접충실험결과현시,미전기인식주적발병솔위75%,이전기인식주균계통성발병,추측유우HC-Pro적대량표체억제료감자체내자신적RNA침묵궤제이사병정가중.기타농예성상조사결과현시,전기인여미전기인식주지간불존재현저차이,표명전HC-Pro화PMI기인대감자적생장혹기타농예성상몰유부면영향.
