新乡学院学报（自然科学版）
新鄉學院學報（自然科學版）
신향학원학보（자연과학판）
JOURNAL OF XINXIANG UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
2期
48-51
,共4页
Ti质粒DNA%质粒扩增%PCR%农杆菌
Ti質粒DNA%質粒擴增%PCR%農桿菌
Ti질립DNA%질립확증%PCR%농간균
以EHA105菌株为实验材料,通过优化质粒扩增条件、加大菌液使用量、改良提取纯化过程中所用试剂等,简化了操作流程,给出了一种高效提取农杆菌中质粒DNA的方法.结果表明,选择LB+KANA为培养基、抗生素质量浓度为50 mg/L,细菌培养至OD600=0.634～0.714时,以5 mL/次用量取菌液裂解;以改进方法提取试剂, 得率与常规方法相当.该方法在满足PCR检测条件的前提下既减少了酚、氯仿等有毒试剂的用量,又省时、经济、方便,为植物转基因工程中目的物DNA的检测提供了技术支持.
以EHA105菌株為實驗材料,通過優化質粒擴增條件、加大菌液使用量、改良提取純化過程中所用試劑等,簡化瞭操作流程,給齣瞭一種高效提取農桿菌中質粒DNA的方法.結果錶明,選擇LB+KANA為培養基、抗生素質量濃度為50 mg/L,細菌培養至OD600=0.634～0.714時,以5 mL/次用量取菌液裂解;以改進方法提取試劑, 得率與常規方法相噹.該方法在滿足PCR檢測條件的前提下既減少瞭酚、氯倣等有毒試劑的用量,又省時、經濟、方便,為植物轉基因工程中目的物DNA的檢測提供瞭技術支持.
이EHA105균주위실험재료,통과우화질립확증조건、가대균액사용량、개량제취순화과정중소용시제등,간화료조작류정,급출료일충고효제취농간균중질립DNA적방법.결과표명,선택LB+KANA위배양기、항생소질량농도위50 mg/L,세균배양지OD600=0.634～0.714시,이5 mL/차용량취균액렬해;이개진방법제취시제, 득솔여상규방법상당.해방법재만족PCR검측조건적전제하기감소료분、록방등유독시제적용량,우성시、경제、방편,위식물전기인공정중목적물DNA적검측제공료기술지지.
