中国皮肤性病学杂志
中國皮膚性病學雜誌
중국피부성병학잡지
THE CHINESE JOURNAL OF DERMATOVENEREOLOGY
2012年
9期
797-800
,共4页
王佩茹%王明悦%朱学骏%陈喜雪
王珮茹%王明悅%硃學駿%陳喜雪
왕패여%왕명열%주학준%진희설
BP180NC16A%IgG1Fc%融合蛋白%真核表达
BP180NC16A%IgG1Fc%融閤蛋白%真覈錶達
BP180NC16A%IgG1Fc%융합단백%진핵표체
目的 构建BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白的真核表达体系.方法 ①以逆转录PCR( reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法从表皮组织提取总RNA中扩增编码人BP180NC16A的cDNA,与包含编码人免疫球蛋白IgG1Fc段恒定区基因的质粒pFUSE-hIgG1 e4-Fc2融合,形成重组pFUSE-hIgG1e4-Fc2-BP180NC16A质粒.②重组质粒转染真核HEK293T细胞,48h后收集细胞培养上清.③通过免疫印迹的方法鉴定转染细胞上清中分泌的BP180NC16A-IgG1 Fc融合蛋白.结果 构建了pFUSE-hIgG1 e4-Fc2-BP180NC16A真核表达质粒并在HEK293T细胞成功表达BP180NC16A-IgG1 Fc融合蛋白.结论 BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白能够成功真核表达.
目的 構建BP180NC16A-IgG1Fc融閤蛋白的真覈錶達體繫.方法 ①以逆轉錄PCR( reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法從錶皮組織提取總RNA中擴增編碼人BP180NC16A的cDNA,與包含編碼人免疫毬蛋白IgG1Fc段恆定區基因的質粒pFUSE-hIgG1 e4-Fc2融閤,形成重組pFUSE-hIgG1e4-Fc2-BP180NC16A質粒.②重組質粒轉染真覈HEK293T細胞,48h後收集細胞培養上清.③通過免疫印跡的方法鑒定轉染細胞上清中分泌的BP180NC16A-IgG1 Fc融閤蛋白.結果 構建瞭pFUSE-hIgG1 e4-Fc2-BP180NC16A真覈錶達質粒併在HEK293T細胞成功錶達BP180NC16A-IgG1 Fc融閤蛋白.結論 BP180NC16A-IgG1Fc融閤蛋白能夠成功真覈錶達.
목적 구건BP180NC16A-IgG1Fc융합단백적진핵표체체계.방법 ①이역전록PCR( reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)방법종표피조직제취총RNA중확증편마인BP180NC16A적cDNA,여포함편마인면역구단백IgG1Fc단항정구기인적질립pFUSE-hIgG1 e4-Fc2융합,형성중조pFUSE-hIgG1e4-Fc2-BP180NC16A질립.②중조질립전염진핵HEK293T세포,48h후수집세포배양상청.③통과면역인적적방법감정전염세포상청중분비적BP180NC16A-IgG1 Fc융합단백.결과 구건료pFUSE-hIgG1 e4-Fc2-BP180NC16A진핵표체질립병재HEK293T세포성공표체BP180NC16A-IgG1 Fc융합단백.결론 BP180NC16A-IgG1Fc융합단백능구성공진핵표체.