国际病毒学杂志
國際病毒學雜誌
국제병독학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF VIROLOGY
2009年
5期
159-封3
,共1页
沈琮%李志会%李鹏%岳盈盈%孟红
瀋琮%李誌會%李鵬%嶽盈盈%孟紅
침종%리지회%리붕%악영영%맹홍
微量细胞培养法%细胞系%肠道病毒属%病毒分离
微量細胞培養法%細胞繫%腸道病毒屬%病毒分離
미량세포배양법%세포계%장도병독속%병독분리
目的 建立用微量高通量、多细胞谱培养法分离未明原因脑炎患儿中病毒的方法,探讨脑炎患儿中肠道病毒的感染情况.为大量、及时分离病毒、病毒鉴定和分子流行病学研究奠定基础.方法 将8株不同的细胞接种于96孔细胞培养板中,每种细胞接种一行,细胞长成单层后孔内接种脑脊液标本,每孔5-10μl,每份标本纵向接种8孔(8种细胞系),35℃、5%CO2培养.出现细胞病变(cytopathic effect,CPE)者传代培养两次.两次均出现CPE者视为细胞培养阳性,-70℃保存用于病毒鉴定.将培养物首先用肠道病毒通用引物做逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)并测序,进行初步筛查.结果 93份标本中有56份出现明显的CPE,病毒分离率为60.22%(56/93),其中在MA104细胞出现病变者40份,阳性率为43.01%.其中6份培养物的RNA用肠道病毒通用引物得到了扩增,序列测定确定为肠道病毒.结论 微量多细胞培养法具有简便、快速等特点,适合用于病毒的初步筛查.
目的 建立用微量高通量、多細胞譜培養法分離未明原因腦炎患兒中病毒的方法,探討腦炎患兒中腸道病毒的感染情況.為大量、及時分離病毒、病毒鑒定和分子流行病學研究奠定基礎.方法 將8株不同的細胞接種于96孔細胞培養闆中,每種細胞接種一行,細胞長成單層後孔內接種腦脊液標本,每孔5-10μl,每份標本縱嚮接種8孔(8種細胞繫),35℃、5%CO2培養.齣現細胞病變(cytopathic effect,CPE)者傳代培養兩次.兩次均齣現CPE者視為細胞培養暘性,-70℃保存用于病毒鑒定.將培養物首先用腸道病毒通用引物做逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)併測序,進行初步篩查.結果 93份標本中有56份齣現明顯的CPE,病毒分離率為60.22%(56/93),其中在MA104細胞齣現病變者40份,暘性率為43.01%.其中6份培養物的RNA用腸道病毒通用引物得到瞭擴增,序列測定確定為腸道病毒.結論 微量多細胞培養法具有簡便、快速等特點,適閤用于病毒的初步篩查.
목적 건립용미량고통량、다세포보배양법분리미명원인뇌염환인중병독적방법,탐토뇌염환인중장도병독적감염정황.위대량、급시분리병독、병독감정화분자류행병학연구전정기출.방법 장8주불동적세포접충우96공세포배양판중,매충세포접충일행,세포장성단층후공내접충뇌척액표본,매공5-10μl,매빈표본종향접충8공(8충세포계),35℃、5%CO2배양.출현세포병변(cytopathic effect,CPE)자전대배양량차.량차균출현CPE자시위세포배양양성,-70℃보존용우병독감정.장배양물수선용장도병독통용인물주역전록취합매련식반응(RT-PCR)병측서,진행초보사사.결과 93빈표본중유56빈출현명현적CPE,병독분리솔위60.22%(56/93),기중재MA104세포출현병변자40빈,양성솔위43.01%.기중6빈배양물적RNA용장도병독통용인물득도료확증,서렬측정학정위장도병독.결론 미량다세포배양법구유간편、쾌속등특점,괄합용우병독적초보사사.
