中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2006年
4期
307-311
,共5页
李印%周清华%孙芝琳%孙泽芳%王艳萍%覃扬%朱文%陈晓禾
李印%週清華%孫芝琳%孫澤芳%王豔萍%覃颺%硃文%陳曉禾
리인%주청화%손지림%손택방%왕염평%담양%주문%진효화
人高转移大细胞肺癌细胞株%nm23-H1 基因%ERK%U0126%增殖%侵袭
人高轉移大細胞肺癌細胞株%nm23-H1 基因%ERK%U0126%增殖%侵襲
인고전이대세포폐암세포주%nm23-H1 기인%ERK%U0126%증식%침습
背景与目的 nm23-H1是公认的肿瘤转移抑制基因.我们的前期研究结果发现nm23-H1基因可明显抑制人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2的活性.本研究旨在探讨肿瘤转移抑制基因nm23-H1及外源性ERK1/2通路抑制剂U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中ERK1/2及其细胞恶性生物学行为的影响,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据.方法 将稳定转染nm23-H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1、原代细胞株L9981(nm23-H1基因杂合性缺失)和转染空载体细胞株L9981-PLXSN培养传代,应用蛋白印迹法(Western blot)和免疫沉淀法,检测应用U0126(40 μmol/L,处理细胞20 min)处理后三个肺癌细胞株中总ERK1/2和双磷酸化ERK1/2表达水平的变化;应用MTT法及改良Boyden小室法分别检测三个肺癌细胞株应用U0126处理后细胞体外增殖活性及侵袭能力的变化.结果 L9981-nm23-H1细胞株磷酸化ERK1/2表达水平、ERK1/2相对活性经U0126处理后均显著低于L9981和L9981-PLXSN细胞株(P＜0.01),而L9981和L9981-PLXSN细胞株间磷酸化ERK1/2表达水平、ERK1/2相对活性比较均无显著性差异(P＞0.05);三个肺癌细胞株总ERK1/2水平处理后比较均无明显变化,差异均无显著性(P＞0.05);L9981-nm23-H1细胞株体外增殖能力及侵袭力均显著低于L9981细胞株和L9981-PLXSN细胞株(P＜0.01);U0126能显著下调L9981细胞株体外增殖活性及侵袭能力(P＜0.01).结论 阻断L9981细胞株中ERK1/2的激活后可发生与转染nm23-H1基因相似的细胞生物学行为的变化,即细胞的体外增殖能力及侵袭力均显著降低,提示nm23-H1基因转染逆转人高转移大细胞肺癌恶性表型的分子机制可能与其下调ERK1/2信号转导通路中关键激酶ERK1/2的活性有关.
揹景與目的 nm23-H1是公認的腫瘤轉移抑製基因.我們的前期研究結果髮現nm23-H1基因可明顯抑製人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981中細胞外信號調節激酶ERK1/2的活性.本研究旨在探討腫瘤轉移抑製基因nm23-H1及外源性ERK1/2通路抑製劑U0126對人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981中ERK1/2及其細胞噁性生物學行為的影響,為闡明nm23-H1基因調控肺癌轉移相關信號傳導通路的分子機製提供實驗依據.方法 將穩定轉染nm23-H1基因的人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981-nm23-H1、原代細胞株L9981(nm23-H1基因雜閤性缺失)和轉染空載體細胞株L9981-PLXSN培養傳代,應用蛋白印跡法(Western blot)和免疫沉澱法,檢測應用U0126(40 μmol/L,處理細胞20 min)處理後三箇肺癌細胞株中總ERK1/2和雙燐痠化ERK1/2錶達水平的變化;應用MTT法及改良Boyden小室法分彆檢測三箇肺癌細胞株應用U0126處理後細胞體外增殖活性及侵襲能力的變化.結果 L9981-nm23-H1細胞株燐痠化ERK1/2錶達水平、ERK1/2相對活性經U0126處理後均顯著低于L9981和L9981-PLXSN細胞株(P＜0.01),而L9981和L9981-PLXSN細胞株間燐痠化ERK1/2錶達水平、ERK1/2相對活性比較均無顯著性差異(P＞0.05);三箇肺癌細胞株總ERK1/2水平處理後比較均無明顯變化,差異均無顯著性(P＞0.05);L9981-nm23-H1細胞株體外增殖能力及侵襲力均顯著低于L9981細胞株和L9981-PLXSN細胞株(P＜0.01);U0126能顯著下調L9981細胞株體外增殖活性及侵襲能力(P＜0.01).結論 阻斷L9981細胞株中ERK1/2的激活後可髮生與轉染nm23-H1基因相似的細胞生物學行為的變化,即細胞的體外增殖能力及侵襲力均顯著降低,提示nm23-H1基因轉染逆轉人高轉移大細胞肺癌噁性錶型的分子機製可能與其下調ERK1/2信號轉導通路中關鍵激酶ERK1/2的活性有關.
배경여목적 nm23-H1시공인적종류전이억제기인.아문적전기연구결과발현nm23-H1기인가명현억제인고전이대세포폐암세포주L9981중세포외신호조절격매ERK1/2적활성.본연구지재탐토종류전이억제기인nm23-H1급외원성ERK1/2통로억제제U0126대인고전이대세포폐암세포주L9981중ERK1/2급기세포악성생물학행위적영향,위천명nm23-H1기인조공폐암전이상관신호전도통로적분자궤제제공실험의거.방법 장은정전염nm23-H1기인적인고전이대세포폐암세포주L9981-nm23-H1、원대세포주L9981(nm23-H1기인잡합성결실)화전염공재체세포주L9981-PLXSN배양전대,응용단백인적법(Western blot)화면역침정법,검측응용U0126(40 μmol/L,처리세포20 min)처리후삼개폐암세포주중총ERK1/2화쌍린산화ERK1/2표체수평적변화;응용MTT법급개량Boyden소실법분별검측삼개폐암세포주응용U0126처리후세포체외증식활성급침습능력적변화.결과 L9981-nm23-H1세포주린산화ERK1/2표체수평、ERK1/2상대활성경U0126처리후균현저저우L9981화L9981-PLXSN세포주(P＜0.01),이L9981화L9981-PLXSN세포주간린산화ERK1/2표체수평、ERK1/2상대활성비교균무현저성차이(P＞0.05);삼개폐암세포주총ERK1/2수평처리후비교균무명현변화,차이균무현저성(P＞0.05);L9981-nm23-H1세포주체외증식능력급침습력균현저저우L9981세포주화L9981-PLXSN세포주(P＜0.01);U0126능현저하조L9981세포주체외증식활성급침습능력(P＜0.01).결론 조단L9981세포주중ERK1/2적격활후가발생여전염nm23-H1기인상사적세포생물학행위적변화,즉세포적체외증식능력급침습력균현저강저,제시nm23-H1기인전염역전인고전이대세포폐암악성표형적분자궤제가능여기하조ERK1/2신호전도통로중관건격매ERK1/2적활성유관.
