上海交通大学学报(医学版)
上海交通大學學報(醫學版)
상해교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2006年
5期
466-469
,共4页
王茸影%邹嫣琼%朱振安%易静
王茸影%鄒嫣瓊%硃振安%易靜
왕용영%추언경%주진안%역정
细胞特异%成纤维细胞%骨形成蛋白-2%胶原蛋白%启动子%增强子%基因治疗
細胞特異%成纖維細胞%骨形成蛋白-2%膠原蛋白%啟動子%增彊子%基因治療
세포특이%성섬유세포%골형성단백-2%효원단백%계동자%증강자%기인치료
目的构建含有胶原蛋白1A2启动子和增强子的人皮肤成纤维细胞(HDFs)特异的非病毒骨形成蛋白-2(BMP-2)表达载体pcDNA3-CEP-BMP-2,验证其是否增强BMP-2特异性在HDFs表达并增强成骨诱导作用,从而探索非病毒载体介导正常细胞的基因修饰用于骨修复的可能性.方法将胶原蛋白增强子、启动子及BMP-2基因导入pcDNA3质粒中,用脂质体法转入HDFs,将血管内皮细胞(VEC)作为对照,RT-PCR检测BMP-2基因在两种细胞中的表达差异,并检测转染后HDFs体外成骨表型.结果转染pcDNA3-CEP-BMP-2在HDFs造成BMP-2表达高于pcDNA3-BMP-2,而在VEC的BMP-2表达不增高.转染了pcDNA3-CEP-BMP-2的HDFs骨钙素的分泌和矿化能力高于pcDNA3-BMP-2.结论胶原蛋白1A2启动子和增强子能特异性地增强BMP-2基因在HDFs中的表达.
目的構建含有膠原蛋白1A2啟動子和增彊子的人皮膚成纖維細胞(HDFs)特異的非病毒骨形成蛋白-2(BMP-2)錶達載體pcDNA3-CEP-BMP-2,驗證其是否增彊BMP-2特異性在HDFs錶達併增彊成骨誘導作用,從而探索非病毒載體介導正常細胞的基因脩飾用于骨脩複的可能性.方法將膠原蛋白增彊子、啟動子及BMP-2基因導入pcDNA3質粒中,用脂質體法轉入HDFs,將血管內皮細胞(VEC)作為對照,RT-PCR檢測BMP-2基因在兩種細胞中的錶達差異,併檢測轉染後HDFs體外成骨錶型.結果轉染pcDNA3-CEP-BMP-2在HDFs造成BMP-2錶達高于pcDNA3-BMP-2,而在VEC的BMP-2錶達不增高.轉染瞭pcDNA3-CEP-BMP-2的HDFs骨鈣素的分泌和礦化能力高于pcDNA3-BMP-2.結論膠原蛋白1A2啟動子和增彊子能特異性地增彊BMP-2基因在HDFs中的錶達.
목적구건함유효원단백1A2계동자화증강자적인피부성섬유세포(HDFs)특이적비병독골형성단백-2(BMP-2)표체재체pcDNA3-CEP-BMP-2,험증기시부증강BMP-2특이성재HDFs표체병증강성골유도작용,종이탐색비병독재체개도정상세포적기인수식용우골수복적가능성.방법장효원단백증강자、계동자급BMP-2기인도입pcDNA3질립중,용지질체법전입HDFs,장혈관내피세포(VEC)작위대조,RT-PCR검측BMP-2기인재량충세포중적표체차이,병검측전염후HDFs체외성골표형.결과전염pcDNA3-CEP-BMP-2재HDFs조성BMP-2표체고우pcDNA3-BMP-2,이재VEC적BMP-2표체불증고.전염료pcDNA3-CEP-BMP-2적HDFs골개소적분비화광화능력고우pcDNA3-BMP-2.결론효원단백1A2계동자화증강자능특이성지증강BMP-2기인재HDFs중적표체.