四川医学
四川醫學
사천의학
SICHUAN MEDICAL JOURNAL
2007年
1期
4-5
,共2页
张建军%史小玲%阳艾玲%袁志平
張建軍%史小玲%暘艾玲%袁誌平
장건군%사소령%양애령%원지평
乙肝%小基因%CD80%DNA疫苗
乙肝%小基因%CD80%DNA疫苗
을간%소기인%CD80%DNA역묘
目的 采用基因重组技术,将乙肝病毒4段小基因与协同刺激分子CD80基因嵌合,构建成嵌合乙肝小基因DNA疫苗.方法 ①根据文献选择和设计HBV的一段pres2、三段core表位编码小基因,以人工合成DNA片段P1～P10,通过退火、连接成为含约170bp的嵌合基因,用HindⅢ酶切;②提取和纯化pcDNA3-CD80,用HindⅢ酶切和去磷酸化;③将酶切小基因定向插入pcDNA3-CD80载体的Hind Ⅲ位点之间,构建成pcHBV-CD80小基因质粒;④pcHBV-CD80转入E.coli JM109扩增、提取质粒,测序鉴定.结果 ①各DNA小片段经退火、连接,成功嵌合为一大小约170bp之目的 基因;②pcDNA3-CD80提取、酶切均成功;③170bp之目的 基因定向克隆到载体上,构建了重组质粒pcHBV-CD80,经测序鉴定均构建正确.结论 乙肝病毒小基因与协同刺激分子CD80嵌合DNA疫苗构建成功.
目的 採用基因重組技術,將乙肝病毒4段小基因與協同刺激分子CD80基因嵌閤,構建成嵌閤乙肝小基因DNA疫苗.方法 ①根據文獻選擇和設計HBV的一段pres2、三段core錶位編碼小基因,以人工閤成DNA片段P1～P10,通過退火、連接成為含約170bp的嵌閤基因,用HindⅢ酶切;②提取和純化pcDNA3-CD80,用HindⅢ酶切和去燐痠化;③將酶切小基因定嚮插入pcDNA3-CD80載體的Hind Ⅲ位點之間,構建成pcHBV-CD80小基因質粒;④pcHBV-CD80轉入E.coli JM109擴增、提取質粒,測序鑒定.結果 ①各DNA小片段經退火、連接,成功嵌閤為一大小約170bp之目的 基因;②pcDNA3-CD80提取、酶切均成功;③170bp之目的 基因定嚮剋隆到載體上,構建瞭重組質粒pcHBV-CD80,經測序鑒定均構建正確.結論 乙肝病毒小基因與協同刺激分子CD80嵌閤DNA疫苗構建成功.
목적 채용기인중조기술,장을간병독4단소기인여협동자격분자CD80기인감합,구건성감합을간소기인DNA역묘.방법 ①근거문헌선택화설계HBV적일단pres2、삼단core표위편마소기인,이인공합성DNA편단P1～P10,통과퇴화、련접성위함약170bp적감합기인,용HindⅢ매절;②제취화순화pcDNA3-CD80,용HindⅢ매절화거린산화;③장매절소기인정향삽입pcDNA3-CD80재체적Hind Ⅲ위점지간,구건성pcHBV-CD80소기인질립;④pcHBV-CD80전입E.coli JM109확증、제취질립,측서감정.결과 ①각DNA소편단경퇴화、련접,성공감합위일대소약170bp지목적 기인;②pcDNA3-CD80제취、매절균성공;③170bp지목적 기인정향극륭도재체상,구건료중조질립pcHBV-CD80,경측서감정균구건정학.결론 을간병독소기인여협동자격분자CD80감합DNA역묘구건성공.
