微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2007年
1期
131-135
,共5页
焦红梅%焦新安%殷月兰%潘志明%孟松树%王禹%蒋金金
焦紅梅%焦新安%慇月蘭%潘誌明%孟鬆樹%王禹%蔣金金
초홍매%초신안%은월란%반지명%맹송수%왕우%장금금
小鼠肝炎病毒%S1基因%减毒沙门氏菌%安全性%免疫特性
小鼠肝炎病毒%S1基因%減毒沙門氏菌%安全性%免疫特性
소서간염병독%S1기인%감독사문씨균%안전성%면역특성
根据GenBank公开序列自行设计一对引物,通过RT-PCR扩增出小鼠肝炎病毒的全长S1基因,并将其插入真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒pVAX1-S1.将重组质粒转染COS-7细胞,采用间接免疫荧光检测出S1蛋白的体外表达.将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,构建出运送DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-S1).分别以5×108CFU、1×109CFU、2×109CFU剂量的重组菌口服接种6周龄BALB/c小鼠,试验结果表明,重组菌对小鼠具有良好的安全性.以1×109CFU剂量的重组菌口服免疫小鼠,抗体检测结果显示,在二免后两周和三免后两周,重组菌免疫组的血清抗体水平与SL7207(pVAX1)空载体免疫组间分别存在显著性差异(P＜0.05)和极显著性差异(P＜0.01).在三免后两周重组菌免疫组出现了较高水平的肠黏膜抗体.
根據GenBank公開序列自行設計一對引物,通過RT-PCR擴增齣小鼠肝炎病毒的全長S1基因,併將其插入真覈錶達質粒pVAX1中,構建齣重組真覈錶達質粒pVAX1-S1.將重組質粒轉染COS-7細胞,採用間接免疫熒光檢測齣S1蛋白的體外錶達.將重組質粒轉入減毒鼠傷寒沙門氏菌SL7207中,構建齣運送DNA疫苗的重組沙門氏菌SL7207(pVAX1-S1).分彆以5×108CFU、1×109CFU、2×109CFU劑量的重組菌口服接種6週齡BALB/c小鼠,試驗結果錶明,重組菌對小鼠具有良好的安全性.以1×109CFU劑量的重組菌口服免疫小鼠,抗體檢測結果顯示,在二免後兩週和三免後兩週,重組菌免疫組的血清抗體水平與SL7207(pVAX1)空載體免疫組間分彆存在顯著性差異(P＜0.05)和極顯著性差異(P＜0.01).在三免後兩週重組菌免疫組齣現瞭較高水平的腸黏膜抗體.
근거GenBank공개서렬자행설계일대인물,통과RT-PCR확증출소서간염병독적전장S1기인,병장기삽입진핵표체질립pVAX1중,구건출중조진핵표체질립pVAX1-S1.장중조질립전염COS-7세포,채용간접면역형광검측출S1단백적체외표체.장중조질립전입감독서상한사문씨균SL7207중,구건출운송DNA역묘적중조사문씨균SL7207(pVAX1-S1).분별이5×108CFU、1×109CFU、2×109CFU제량적중조균구복접충6주령BALB/c소서,시험결과표명,중조균대소서구유량호적안전성.이1×109CFU제량적중조균구복면역소서,항체검측결과현시,재이면후량주화삼면후량주,중조균면역조적혈청항체수평여SL7207(pVAX1)공재체면역조간분별존재현저성차이(P＜0.05)화겁현저성차이(P＜0.01).재삼면후량주중조균면역조출현료교고수평적장점막항체.
