CAJ | 학술논문

本研究探讨凋亡白血病细胞负载的树突状细胞(dendritic cells,DC)能否诱导特异性细胞毒T淋巴细胞反应.用青蒿琥酯诱导U937细胞凋亡,从正常人外周血单个核细胞诱生DC,将凋亡U937细胞负载DC,并添加TNF-α诱导DC成熟,然后与自体T淋巴细胞共育,并联合IL-2以诱生细胞毒性T淋巴细胞(CTL);应用流式细胞术分析DC和T细胞免疫表型,采用Dextran-FITC内吞试验检测DC的抗原摄取能力;用ELISA法检测Il-12p70的产生;采用MTT法检测凋亡U937细胞负载及未负载DC诱导的自体T淋巴细胞对不同的靶细胞(U937细胞和NB4细胞)的杀伤效应.结果表明:青蒿琥酯1μg/ml作用于U937细胞48小时后,U937细胞的凋亡率达51.52%,DC在未成熟阶段时吞噬Dextran-FITC的能力最强,负载凋亡U937细胞之后并不能促使未成熟DC(iDC)分化为成熟DC(mDC).凋亡U937细胞负载后的iDC在TNF-α的作用下能够成为mDC.与未负载的mDC相比,凋亡U937细胞负载后的mDC(mDC-ApoU937)分泌IL-12p70水平明显增高,而且由其所激发和扩增的T细胞以CD8+的T细胞为主.细胞毒性实验显示:mDC-ApoU937诱导的T细胞的对U937细胞的杀伤显著超过对NB4细胞的杀伤.结论:mDC-ApoU937能有效地诱导特异性抗白血病效应.
본연구탐토조망백혈병세포부재적수돌상세포(dendritic cells,DC)능부유도특이성세포독T림파세포반응.용청호호지유도U937세포조망,종정상인외주혈단개핵세포유생DC,장조망U937세포부재DC,병첨가TNF-α유도DC성숙,연후여자체T림파세포공육,병연합IL-2이유생세포독성T림파세포(CTL);응용류식세포술분석DC화T세포면역표형,채용Dextran-FITC내탄시험검측DC적항원섭취능력;용ELISA법검측Il-12p70적산생;채용MTT법검측조망U937세포부재급미부재DC유도적자체T림파세포대불동적파세포(U937세포화NB4세포)적살상효응.결과표명:청호호지1μg/ml작용우U937세포48소시후,U937세포적조망솔체51.52%,DC재미성숙계단시탄서Dextran-FITC적능력최강,부재조망U937세포지후병불능촉사미성숙DC(iDC)분화위성숙DC(mDC).조망U937세포부재후적iDC재TNF-α적작용하능구성위mDC.여미부재적mDC상비,조망U937세포부재후적mDC(mDC-ApoU937)분비IL-12p70수평명현증고,이차유기소격발화확증적T세포이CD8+적T세포위주.세포독성실험현시:mDC-ApoU937유도적T세포적대U937세포적살상현저초과대NB4세포적살상.결론:mDC-ApoU937능유효지유도특이성항백혈병효응.