南京师大学报（自然科学版）
南京師大學報（自然科學版）
남경사대학보（자연과학판）
JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
3期
70-75
,共6页
季勤%张云峰%罗玉明%徐春%黄翠香
季勤%張雲峰%囉玉明%徐春%黃翠香
계근%장운봉%라옥명%서춘%황취향
SBD重组蛋白%相容性溶质%高渗胁迫%可溶性表达
SBD重組蛋白%相容性溶質%高滲脅迫%可溶性錶達
SBD중조단백%상용성용질%고삼협박%가용성표체
在基因工程的操作中, 包涵体的形成是人们利用大肠杆菌表达外源蛋白质的一大难点. 本研究将环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)环状糊精糖基转移酶 (CGTase) 的淀粉粒结合域 (SBD) 基因编码序列的两个拷贝通过一连接肽连接 (SBD2) 后, 克隆到大肠杆菌表达载体pTrcHis B上, 得到的pTrcHis B/SBD2质粒转化大肠杆菌Top10, 研究了不同培养基、不同诱导温度和时间对SBD2蛋白表达的影响. 结果表明, 利用相容性溶质山梨醇和甜菜碱等, 在高盐胁迫下, 实现了SBD2重组蛋白质在大肠杆菌中的可溶性表达, 这一结果为在体外研究SBD2蛋白的功能奠定了基础.
在基因工程的操作中, 包涵體的形成是人們利用大腸桿菌錶達外源蛋白質的一大難點. 本研究將環狀芽孢桿菌(Bacillus circulans)環狀糊精糖基轉移酶 (CGTase) 的澱粉粒結閤域 (SBD) 基因編碼序列的兩箇拷貝通過一連接肽連接 (SBD2) 後, 剋隆到大腸桿菌錶達載體pTrcHis B上, 得到的pTrcHis B/SBD2質粒轉化大腸桿菌Top10, 研究瞭不同培養基、不同誘導溫度和時間對SBD2蛋白錶達的影響. 結果錶明, 利用相容性溶質山梨醇和甜菜堿等, 在高鹽脅迫下, 實現瞭SBD2重組蛋白質在大腸桿菌中的可溶性錶達, 這一結果為在體外研究SBD2蛋白的功能奠定瞭基礎.
재기인공정적조작중, 포함체적형성시인문이용대장간균표체외원단백질적일대난점. 본연구장배상아포간균(Bacillus circulans)배상호정당기전이매 (CGTase) 적정분립결합역 (SBD) 기인편마서렬적량개고패통과일련접태련접 (SBD2) 후, 극륭도대장간균표체재체pTrcHis B상, 득도적pTrcHis B/SBD2질립전화대장간균Top10, 연구료불동배양기、불동유도온도화시간대SBD2단백표체적영향. 결과표명, 이용상용성용질산리순화첨채감등, 재고염협박하, 실현료SBD2중조단백질재대장간균중적가용성표체, 저일결과위재체외연구SBD2단백적공능전정료기출.
