中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2011年
1期
71-73
,共3页
张小萍%朱倩%何艳燕%江莉%蒋守富
張小萍%硃倩%何豔燕%江莉%蔣守富
장소평%주천%하염연%강리%장수부
隐孢子虫%卵囊%FTA-PCR%检测%水样
隱孢子蟲%卵囊%FTA-PCR%檢測%水樣
은포자충%란낭%FTA-PCR%검측%수양
目的 建立FTA-PCR方法,并应用于水源中隐孢子虫污染的基因检测.方法 用免疫磁珠(IMS)分离纯化隐孢子卵囊,采用FTA卡提取隐孢子卵囊DNA,根据隐孢子虫18 S rRNA的基因序列设计引物,对模板DNA进行PCR扩增,同时以刚地弓形虫、猪人肉孢子虫、细粒棘球蚴和华支睾吸虫等DNA样本作对照.用琼脂糖电泳和溴乙腚染色对PCR产物进行检测.结果 微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫和贝氏隐孢子虫均扩增出446 bp左右的DNA片段,其他对照DNA样本均未出现扩增反应.应用FTA-PCR检测上海市5个区自来水10份,未出现特异性条带;检测15份水源水、25份黄浦江水、15份动物饲养场周边河水、9份污水处理厂出水和6份生活污水排污口水,分别检测出0、2、5、1份和1份共9份阳性,阳性样品均扩增出约446 bp的特异性片段.结论 FTA-PCR可用于水样中隐孢子虫污染的基因检测.动物饲养场周边河水受隐孢子虫污染程度较高.
目的 建立FTA-PCR方法,併應用于水源中隱孢子蟲汙染的基因檢測.方法 用免疫磁珠(IMS)分離純化隱孢子卵囊,採用FTA卡提取隱孢子卵囊DNA,根據隱孢子蟲18 S rRNA的基因序列設計引物,對模闆DNA進行PCR擴增,同時以剛地弓形蟲、豬人肉孢子蟲、細粒棘毬蚴和華支睪吸蟲等DNA樣本作對照.用瓊脂糖電泳和溴乙腚染色對PCR產物進行檢測.結果 微小隱孢子蟲、安氏隱孢子蟲和貝氏隱孢子蟲均擴增齣446 bp左右的DNA片段,其他對照DNA樣本均未齣現擴增反應.應用FTA-PCR檢測上海市5箇區自來水10份,未齣現特異性條帶;檢測15份水源水、25份黃浦江水、15份動物飼養場週邊河水、9份汙水處理廠齣水和6份生活汙水排汙口水,分彆檢測齣0、2、5、1份和1份共9份暘性,暘性樣品均擴增齣約446 bp的特異性片段.結論 FTA-PCR可用于水樣中隱孢子蟲汙染的基因檢測.動物飼養場週邊河水受隱孢子蟲汙染程度較高.
목적 건립FTA-PCR방법,병응용우수원중은포자충오염적기인검측.방법 용면역자주(IMS)분리순화은포자란낭,채용FTA잡제취은포자란낭DNA,근거은포자충18 S rRNA적기인서렬설계인물,대모판DNA진행PCR확증,동시이강지궁형충、저인육포자충、세립극구유화화지고흡충등DNA양본작대조.용경지당전영화추을정염색대PCR산물진행검측.결과 미소은포자충、안씨은포자충화패씨은포자충균확증출446 bp좌우적DNA편단,기타대조DNA양본균미출현확증반응.응용FTA-PCR검측상해시5개구자래수10빈,미출현특이성조대;검측15빈수원수、25빈황포강수、15빈동물사양장주변하수、9빈오수처리엄출수화6빈생활오수배오구수,분별검측출0、2、5、1빈화1빈공9빈양성,양성양품균확증출약446 bp적특이성편단.결론 FTA-PCR가용우수양중은포자충오염적기인검측.동물사양장주변하수수은포자충오염정도교고.