中国血液流变学杂志
中國血液流變學雜誌
중국혈액류변학잡지
CHINESE JOURNAL OF HEMORHEOLOGY
2012年
1期
12-15,23
,共5页
邹士涛%姜智%周未%吴士良
鄒士濤%薑智%週未%吳士良
추사도%강지%주미%오사량
c-jun%siRNA%胃癌细胞SGC7901%β3GnT8
c-jun%siRNA%胃癌細胞SGC7901%β3GnT8
c-jun%siRNA%위암세포SGC7901%β3GnT8
目的 构建c-jun干扰载体,有效沉默胃癌SGC7901细胞株中的c-jun基因表达,研究其对胃癌SGC7901细胞株中β3GnT8基因表达的影响.方法 ①利用互联网资源针对c-jun基因的靶序列设计合成四条siRNA,将四条siRNA插入到RNA干扰载体pGPU6/GFP/Neo中构建成四条干扰载体.②将构建好的c-jun siRNA载体质粒pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1949、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1050、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1111、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1276通过阳离子脂质体将表达质粒分别转染SGC7901细胞,48h后荧光显微镜下观察不同浓度质粒的转染效率,通过RT-PCR法检测c-jun和β3GnT8基因mRNA的表达.结果 ①成功构建了四条正确的c-jun siRNA表达质粒;②成功筛选出一条对c-jun有明显抑制作用的siRNA干扰质粒,阻断c-jun表达后,糖基转移酶β3GnT8的表达受到明显抑制.结论 构建的c-jun siRNA表达质粒可以有效抑制胃癌SGC7901细胞株的c-jun基因表达,同时抑制糖基转移酶β3GnT8的表达,为研究胃癌的分子机制提供了一定的理论基础.
目的 構建c-jun榦擾載體,有效沉默胃癌SGC7901細胞株中的c-jun基因錶達,研究其對胃癌SGC7901細胞株中β3GnT8基因錶達的影響.方法 ①利用互聯網資源針對c-jun基因的靶序列設計閤成四條siRNA,將四條siRNA插入到RNA榦擾載體pGPU6/GFP/Neo中構建成四條榦擾載體.②將構建好的c-jun siRNA載體質粒pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1949、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1050、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1111、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1276通過暘離子脂質體將錶達質粒分彆轉染SGC7901細胞,48h後熒光顯微鏡下觀察不同濃度質粒的轉染效率,通過RT-PCR法檢測c-jun和β3GnT8基因mRNA的錶達.結果 ①成功構建瞭四條正確的c-jun siRNA錶達質粒;②成功篩選齣一條對c-jun有明顯抑製作用的siRNA榦擾質粒,阻斷c-jun錶達後,糖基轉移酶β3GnT8的錶達受到明顯抑製.結論 構建的c-jun siRNA錶達質粒可以有效抑製胃癌SGC7901細胞株的c-jun基因錶達,同時抑製糖基轉移酶β3GnT8的錶達,為研究胃癌的分子機製提供瞭一定的理論基礎.
목적 구건c-jun간우재체,유효침묵위암SGC7901세포주중적c-jun기인표체,연구기대위암SGC7901세포주중β3GnT8기인표체적영향.방법 ①이용호련망자원침대c-jun기인적파서렬설계합성사조siRNA,장사조siRNA삽입도RNA간우재체pGPU6/GFP/Neo중구건성사조간우재체.②장구건호적c-jun siRNA재체질립pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1949、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1050、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1111、pGPU6/GFP/Neo-sic-jun-1276통과양리자지질체장표체질립분별전염SGC7901세포,48h후형광현미경하관찰불동농도질립적전염효솔,통과RT-PCR법검측c-jun화β3GnT8기인mRNA적표체.결과 ①성공구건료사조정학적c-jun siRNA표체질립;②성공사선출일조대c-jun유명현억제작용적siRNA간우질립,조단c-jun표체후,당기전이매β3GnT8적표체수도명현억제.결론 구건적c-jun siRNA표체질립가이유효억제위암SGC7901세포주적c-jun기인표체,동시억제당기전이매β3GnT8적표체,위연구위암적분자궤제제공료일정적이론기출.
