CAJ | 학술논문

背景:CM-DiI是DiI的衍生物,因具有一定的水溶性,且含有氯甲基化活性巯基部分,使其更易嵌入、弥散并稳固地结合到整个细胞膜上,使染色更快捷、均匀、持久.目的:进一步验证荧光染料CM-DiI标记大鼠脂肪干细胞的可行性.方法:切取大鼠腹股沟区皮下脂肪组织,采用胶原酶消化法体外分离培养脂肪干细胞,取第3代细胞分为实验组和对照组,用质量浓度4 mg/L的CM-DiI对实验组细胞进行标记,于6,12,24,48 h观察CM-DiI标记脂肪干细胞体内示踪效果.结果与结论:荧光显微镜下CM-DiI标记细胞的胞浆、胞膜均显红色荧光,标记的脂肪干细胞呈梭形,保持了良好的正常形态,CM-DiI标记阳性率为100%,标记早期细胞形态呈荧光环状,48 h后细胞中荧光颗粒增多,荧光增强,细胞核未染荧光.与对照组比较,CM-DiI标记的细胞增殖后形态、上清液乳酸脱氢酶含量及MTT值均无明显变化 (P > 0.05).细胞移植后4 h后,在心、肺组织可见到发出红色荧光的标记细胞.提示CM-DiI能有效标记体外培养的脂肪干细胞,并在细胞内稳定表达,且标记细胞形态良好,对活体细胞无毒性.体内移植后,有良好的示踪效果.
배경:CM-DiI시DiI적연생물,인구유일정적수용성,차함유록갑기화활성구기부분,사기경역감입、미산병은고지결합도정개세포막상,사염색경쾌첩、균균、지구.목적:진일보험증형광염료CM-DiI표기대서지방간세포적가행성.방법:절취대서복고구구피하지방조직,채용효원매소화법체외분리배양지방간세포,취제3대세포분위실험조화대조조,용질량농도4 mg/L적CM-DiI대실험조세포진행표기,우6,12,24,48 h관찰CM-DiI표기지방간세포체내시종효과.결과여결론:형광현미경하CM-DiI표기세포적포장、포막균현홍색형광,표기적지방간세포정사형,보지료량호적정상형태,CM-DiI표기양성솔위100%,표기조기세포형태정형광배상,48 h후세포중형광과립증다,형광증강,세포핵미염형광.여대조조비교,CM-DiI표기적세포증식후형태、상청액유산탈경매함량급MTT치균무명현변화 (P > 0.05).세포이식후4 h후,재심、폐조직가견도발출홍색형광적표기세포.제시CM-DiI능유효표기체외배양적지방간세포,병재세포내은정표체,차표기세포형태량호,대활체세포무독성.체내이식후,유량호적시종효과.