分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2004年
3期
358-364
,共7页
梅文倩%宋文强%潘怡%巩威%朱玉贤
梅文倩%宋文彊%潘怡%鞏威%硃玉賢
매문천%송문강%반이%공위%주옥현
Gateway克隆技术%转录因子%Western-blot%聚类分析
Gateway剋隆技術%轉錄因子%Western-blot%聚類分析
Gateway극륭기술%전록인자%Western-blot%취류분석
随着越来越多基因组全序列的测定完成,基因组的研究进入了功能研究阶段.功能基因组的研究需要把大量基因连入不同载体,传统的酶切连接构建载体的方法不能满足这种大规模克隆的需要.Gateway技术是一种高效的大规模克隆系统,而且对载体和宿主没有依赖性.本文利用Gateway大规模克隆技术将16个拟南芥转录因子的ORF克隆入植物表达载pPTV和酵母表达载体pYTV中,酵母融合表达实验和West-ern-blot检测证明了该克隆途径的可行性,并且得到的His-Tag融合蛋白,为拟南芥转录因子的大规模蛋白质组学研究奠定了良好的基础,同时基因序列的聚类分析为将来进一步的功能研究提供了有利信息.
隨著越來越多基因組全序列的測定完成,基因組的研究進入瞭功能研究階段.功能基因組的研究需要把大量基因連入不同載體,傳統的酶切連接構建載體的方法不能滿足這種大規模剋隆的需要.Gateway技術是一種高效的大規模剋隆繫統,而且對載體和宿主沒有依賴性.本文利用Gateway大規模剋隆技術將16箇擬南芥轉錄因子的ORF剋隆入植物錶達載pPTV和酵母錶達載體pYTV中,酵母融閤錶達實驗和West-ern-blot檢測證明瞭該剋隆途徑的可行性,併且得到的His-Tag融閤蛋白,為擬南芥轉錄因子的大規模蛋白質組學研究奠定瞭良好的基礎,同時基因序列的聚類分析為將來進一步的功能研究提供瞭有利信息.
수착월래월다기인조전서렬적측정완성,기인조적연구진입료공능연구계단.공능기인조적연구수요파대량기인련입불동재체,전통적매절련접구건재체적방법불능만족저충대규모극륭적수요.Gateway기술시일충고효적대규모극륭계통,이차대재체화숙주몰유의뢰성.본문이용Gateway대규모극륭기술장16개의남개전록인자적ORF극륭입식물표체재pPTV화효모표체재체pYTV중,효모융합표체실험화West-ern-blot검측증명료해극륭도경적가행성,병차득도적His-Tag융합단백,위의남개전록인자적대규모단백질조학연구전정료량호적기출,동시기인서렬적취류분석위장래진일보적공능연구제공료유리신식.
