中西医结合心脑血管病杂志
中西醫結閤心腦血管病雜誌
중서의결합심뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATIVE MEDICINE ON CARDIO-/CEREBROVASCULAR DISEASE
2010年
3期
333-335
,共3页
葡萄籽原花青素%骨髓间充质干细胞%神经元%自由基%凋亡
葡萄籽原花青素%骨髓間充質榦細胞%神經元%自由基%凋亡
포도자원화청소%골수간충질간세포%신경원%자유기%조망
目的 探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSP)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导分化后神经元样细胞是否具有抗凋亡作用及作用的最适剂量.方法 BMSCs由成年健康雄性WISTAR大鼠股骨全骨髓法取得,经贴壁培养法分离纯化,取第五代BMSCs用低中高剂量(20 mg/L、40 mg/L、80 mg/L)GSP干预24 h,设立空白对照组.以含有20%胎牛血清的1 mmol/L B-巯基乙醇(BME)预诱导24 h后,继而用含有40 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的无血清培养基作为诱导液诱导24 h.采用免疫细胞化学法鉴定神经细胞特异性抗原标记神经元特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)和微管相关蛋白-2 (microtubule-associated protein 2,MAP-2)的表达.MTT法检测不同剂量的GSP干预24 h后对神经元样细胞活力的影响,流式细胞仪检测以Fluo-3 AM为荧光探针标记的细胞内游离钙浓度,以Annexin V凋亡试剂盒检测组间细胞凋亡率.结果 成功分离培养WISTAR大鼠BMSCs,经诱导分化后大部BMSCs变成神经元样细胞并表达NSE和MAP-2.GSP干预组细胞生长状态,活力及存活细胞比例较好.结论 GSP能使BMSCs诱导分化后神经元样细胞保持较好的活力,对抗自由基产生,减少细胞凋亡.
目的 探討葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSP)對骨髓間充質榦細胞(BMSCs)誘導分化後神經元樣細胞是否具有抗凋亡作用及作用的最適劑量.方法 BMSCs由成年健康雄性WISTAR大鼠股骨全骨髓法取得,經貼壁培養法分離純化,取第五代BMSCs用低中高劑量(20 mg/L、40 mg/L、80 mg/L)GSP榦預24 h,設立空白對照組.以含有20%胎牛血清的1 mmol/L B-巰基乙醇(BME)預誘導24 h後,繼而用含有40 ng/mL堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的無血清培養基作為誘導液誘導24 h.採用免疫細胞化學法鑒定神經細胞特異性抗原標記神經元特異性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)和微管相關蛋白-2 (microtubule-associated protein 2,MAP-2)的錶達.MTT法檢測不同劑量的GSP榦預24 h後對神經元樣細胞活力的影響,流式細胞儀檢測以Fluo-3 AM為熒光探針標記的細胞內遊離鈣濃度,以Annexin V凋亡試劑盒檢測組間細胞凋亡率.結果 成功分離培養WISTAR大鼠BMSCs,經誘導分化後大部BMSCs變成神經元樣細胞併錶達NSE和MAP-2.GSP榦預組細胞生長狀態,活力及存活細胞比例較好.結論 GSP能使BMSCs誘導分化後神經元樣細胞保持較好的活力,對抗自由基產生,減少細胞凋亡.
목적 탐토포도자원화청소(grape seed proanthocyanidins,GSP)대골수간충질간세포(BMSCs)유도분화후신경원양세포시부구유항조망작용급작용적최괄제량.방법 BMSCs유성년건강웅성WISTAR대서고골전골수법취득,경첩벽배양법분리순화,취제오대BMSCs용저중고제량(20 mg/L、40 mg/L、80 mg/L)GSP간예24 h,설립공백대조조.이함유20%태우혈청적1 mmol/L B-구기을순(BME)예유도24 h후,계이용함유40 ng/mL감성성섬유세포생장인자(bFGF)적무혈청배양기작위유도액유도24 h.채용면역세포화학법감정신경세포특이성항원표기신경원특이성희순화매(neuronspecificenolase,NSE)화미관상관단백-2 (microtubule-associated protein 2,MAP-2)적표체.MTT법검측불동제량적GSP간예24 h후대신경원양세포활력적영향,류식세포의검측이Fluo-3 AM위형광탐침표기적세포내유리개농도,이Annexin V조망시제합검측조간세포조망솔.결과 성공분리배양WISTAR대서BMSCs,경유도분화후대부BMSCs변성신경원양세포병표체NSE화MAP-2.GSP간예조세포생장상태,활력급존활세포비례교호.결론 GSP능사BMSCs유도분화후신경원양세포보지교호적활력,대항자유기산생,감소세포조망.
