中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
3期
365-370
,共6页
microRNA-21%VEGF%AP1%T24细胞%膀胱肿瘤
microRNA-21%VEGF%AP1%T24細胞%膀胱腫瘤
microRNA-21%VEGF%AP1%T24세포%방광종류
[目的]研究microRNA-21(miR-21)对膀胱癌T24细胞系中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和活化因子蛋白-1(activator protein-1,AP1)及mRNA表达的调节作用,探讨miR-21对膀胱癌T24细胞增殖的影响.[方法]用人工合成的miR-21相应的双链互补DNA片段,插入pSilencerrTM 3.1-H1 neo载体表达载体,经测序鉴定后作为microRNA的表达质粒:用脂质体将miR-21高表达质粒转染进T24膀胱癌细胞,经G418筛选获得阳性克隆.用RT-PCR技术和Westem blot方法分别检测该细胞系中VEGF和AP1的mRNA和蛋白表达情况.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测膀胱癌T24细胞增殖的变化情况.[结果]Western blot结果显示miR-21能够增加VEGF和AP1蛋白的表达,RT-PCR方法分析显示VEGF和AP1 mRNA水平升高.MTT显示转染后细胞的生长速率比未转染的细胞明显加快.[结论]miR-21促进T24膀胱癌细胞增殖,提示可能与VEGF和AP1的低表达有关.
[目的]研究microRNA-21(miR-21)對膀胱癌T24細胞繫中血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和活化因子蛋白-1(activator protein-1,AP1)及mRNA錶達的調節作用,探討miR-21對膀胱癌T24細胞增殖的影響.[方法]用人工閤成的miR-21相應的雙鏈互補DNA片段,插入pSilencerrTM 3.1-H1 neo載體錶達載體,經測序鑒定後作為microRNA的錶達質粒:用脂質體將miR-21高錶達質粒轉染進T24膀胱癌細胞,經G418篩選穫得暘性剋隆.用RT-PCR技術和Westem blot方法分彆檢測該細胞繫中VEGF和AP1的mRNA和蛋白錶達情況.四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測膀胱癌T24細胞增殖的變化情況.[結果]Western blot結果顯示miR-21能夠增加VEGF和AP1蛋白的錶達,RT-PCR方法分析顯示VEGF和AP1 mRNA水平升高.MTT顯示轉染後細胞的生長速率比未轉染的細胞明顯加快.[結論]miR-21促進T24膀胱癌細胞增殖,提示可能與VEGF和AP1的低錶達有關.
[목적]연구microRNA-21(miR-21)대방광암T24세포계중혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)화활화인자단백-1(activator protein-1,AP1)급mRNA표체적조절작용,탐토miR-21대방광암T24세포증식적영향.[방법]용인공합성적miR-21상응적쌍련호보DNA편단,삽입pSilencerrTM 3.1-H1 neo재체표체재체,경측서감정후작위microRNA적표체질립:용지질체장miR-21고표체질립전염진T24방광암세포,경G418사선획득양성극륭.용RT-PCR기술화Westem blot방법분별검측해세포계중VEGF화AP1적mRNA화단백표체정황.사갑기우담서람(MTT)법검측방광암T24세포증식적변화정황.[결과]Western blot결과현시miR-21능구증가VEGF화AP1단백적표체,RT-PCR방법분석현시VEGF화AP1 mRNA수평승고.MTT현시전염후세포적생장속솔비미전염적세포명현가쾌.[결론]miR-21촉진T24방광암세포증식,제시가능여VEGF화AP1적저표체유관.
