江西农业学报
江西農業學報
강서농업학보
ACTA AGRICULTURAE JIANGXI
2010年
6期
126-129
,共4页
刘宗争%尹逊河%栾文华%苏赛
劉宗爭%尹遜河%欒文華%囌賽
류종쟁%윤손하%란문화%소새
ORF2%大肠杆菌%基因表达%免疫效力
ORF2%大腸桿菌%基因錶達%免疫效力
ORF2%대장간균%기인표체%면역효력
利用基因克隆方法,将PCV2的ORF2基因PCR扩增并酶切后连入pET-32a载体,构建重组质粒.重组质粒经PCR 和酶切鉴定并测序后,转化大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Western Blotting分析鉴定后,与PCV2灭活抗原分别与弗氏不完全佐剂乳化,并分别免疫仔猪以比较免疫效力.结果为PCV2的Cap蛋白得到正确表达,免疫保护性试验结果显示,相对于灭活抗原制备的疫苗,表达的Cap蛋白制备的疫苗具有更好的免疫原性和保护效力.
利用基因剋隆方法,將PCV2的ORF2基因PCR擴增併酶切後連入pET-32a載體,構建重組質粒.重組質粒經PCR 和酶切鑒定併測序後,轉化大腸桿菌BL21進行IPTG誘導錶達.錶達產物經SDS-PAGE和Western Blotting分析鑒定後,與PCV2滅活抗原分彆與弗氏不完全佐劑乳化,併分彆免疫仔豬以比較免疫效力.結果為PCV2的Cap蛋白得到正確錶達,免疫保護性試驗結果顯示,相對于滅活抗原製備的疫苗,錶達的Cap蛋白製備的疫苗具有更好的免疫原性和保護效力.
이용기인극륭방법,장PCV2적ORF2기인PCR확증병매절후련입pET-32a재체,구건중조질립.중조질립경PCR 화매절감정병측서후,전화대장간균BL21진행IPTG유도표체.표체산물경SDS-PAGE화Western Blotting분석감정후,여PCV2멸활항원분별여불씨불완전좌제유화,병분별면역자저이비교면역효력.결과위PCV2적Cap단백득도정학표체,면역보호성시험결과현시,상대우멸활항원제비적역묘,표체적Cap단백제비적역묘구유경호적면역원성화보호효력.
