CAJ | 학술논문

目的探讨抗主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子转录激活因子的锤头状核酶对Raji细胞表面经典MHCⅡ类抗原表达的抑制作用.方法设计并克隆针对MHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)第134、218、464位点的3个核酶片段(Rz134、Rz218、Rz464)及其相应的CⅡTA靶基因,分别插入pGEM-T载体,进行细胞外切割活性筛选.将切割作用明显的Rz464亚克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP,成为pIRES2-EGFP-Rz464(pRz464),将pRz464稳定转染Raji细胞株,流式细胞术检测Raji细胞表面MHCⅡ类抗原(HLA-DR、DP、DQ)的表达,并用逆转录聚合酶链反应分析Raji细胞CⅡTA mRNA的表达.结果转染pRz464的Raji细胞表面HLA-DR、DP、DQ抗原表达抑制率分别为95.93%、94.14%及98.32%,同时其CⅡTA mRNA的表达显著下调(P＜0.05).结论Rz464可抑制Raji细胞表面MHCⅡ类抗原的表达.
목적탐토항주요조직상용성복합물(MHC)Ⅱ류분자전록격활인자적추두상핵매대Raji세포표면경전MHCⅡ류항원표체적억제작용.방법설계병극륭침대MHCⅡ류분자전록격활인자(CⅡTA)제134、218、464위점적3개핵매편단(Rz134、Rz218、Rz464)급기상응적CⅡTA파기인,분별삽입pGEM-T재체,진행세포외절할활성사선.장절할작용명현적Rz464아극륭입진핵표체재체pIRES2-EGFP,성위pIRES2-EGFP-Rz464(pRz464),장pRz464은정전염Raji세포주,류식세포술검측Raji세포표면MHCⅡ류항원(HLA-DR、DP、DQ)적표체,병용역전록취합매련반응분석Raji세포CⅡTA mRNA적표체.결과전염pRz464적Raji세포표면HLA-DR、DP、DQ항원표체억제솔분별위95.93%、94.14%급98.32%,동시기CⅡTA mRNA적표체현저하조(P＜0.05).결론Rz464가억제Raji세포표면MHCⅡ류항원적표체.