第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2003年
18期
1668-1670
,共3页
郭晏海%吕贯庭%白玉洁%赵锦荣%张菊%闫小君
郭晏海%呂貫庭%白玉潔%趙錦榮%張菊%閆小君
곽안해%려관정%백옥길%조금영%장국%염소군
荧光偏振%突变%肝炎病毒,乙型%DNA
熒光偏振%突變%肝炎病毒,乙型%DNA
형광편진%돌변%간염병독,을형%DNA
目的: 建立简便、灵敏的HBV DNA序列中BCP双突变点的检测方法. 方法: 采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测. 首先对HBVC区基因进行PCR扩增,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交,使探针的3′端可以在DNA聚合酶的催化下,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的ddNTP,然后检测该3′端带有荧光素的探针,根据检测到的荧光素种类和偏振光的强度可以判定待测点是何种核苷酸. 结果: 该方法可以检测出HBV 基因序列中BCP双突变核苷酸类型以及检测1个拷贝的模板,并且可以从BCP野性株DNA序列中检出5%BCP双突变DNA序列. 结论: 该技术可以检测血清中HBV DNA C区BCP双突变.
目的: 建立簡便、靈敏的HBV DNA序列中BCP雙突變點的檢測方法. 方法: 採用終點終止法和偏振光檢測技術進行點突變的檢測. 首先對HBVC區基因進行PCR擴增,然後用特異探針與擴增產物中待測覈苷痠的下遊序列雜交,使探針的3′耑可以在DNA聚閤酶的催化下,依據其互補鏈上的待測覈苷痠連接上一箇標有特定熒光素的ddNTP,然後檢測該3′耑帶有熒光素的探針,根據檢測到的熒光素種類和偏振光的彊度可以判定待測點是何種覈苷痠. 結果: 該方法可以檢測齣HBV 基因序列中BCP雙突變覈苷痠類型以及檢測1箇拷貝的模闆,併且可以從BCP野性株DNA序列中檢齣5%BCP雙突變DNA序列. 結論: 該技術可以檢測血清中HBV DNA C區BCP雙突變.
목적: 건립간편、령민적HBV DNA서렬중BCP쌍돌변점적검측방법. 방법: 채용종점종지법화편진광검측기술진행점돌변적검측. 수선대HBVC구기인진행PCR확증,연후용특이탐침여확증산물중대측핵감산적하유서렬잡교,사탐침적3′단가이재DNA취합매적최화하,의거기호보련상적대측핵감산련접상일개표유특정형광소적ddNTP,연후검측해3′단대유형광소적탐침,근거검측도적형광소충류화편진광적강도가이판정대측점시하충핵감산. 결과: 해방법가이검측출HBV 기인서렬중BCP쌍돌변핵감산류형이급검측1개고패적모판,병차가이종BCP야성주DNA서렬중검출5%BCP쌍돌변DNA서렬. 결론: 해기술가이검측혈청중HBV DNA C구BCP쌍돌변.
