自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2004年
1期
46-50
,共5页
茅卫锋%汪亚平%孙永华%吴刚%陈尚萍%朱作言
茅衛鋒%汪亞平%孫永華%吳剛%陳尚萍%硃作言
모위봉%왕아평%손영화%오강%진상평%주작언
增强绿色荧光蛋白(EGFP) 组蛋白H3启动子 转基因鱼 稀有鮈鲫
增彊綠色熒光蛋白(EGFP) 組蛋白H3啟動子 轉基因魚 稀有鮈鯽
증강록색형광단백(EGFP) 조단백H3계동자 전기인어 희유구즉
使用高保真PCR方法从虹鳟鱼基因组中克隆得到虹鳟鱼组蛋白H3启动子.将虹鳟鱼组蛋白H3启动子插入启动子缺失的增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-1中,构建成重组载体pRH3EGFP-1.通过显微注射法得到转pRH3EGFP-1稀有鮈鲫.在荧光解剖镜下,可以清楚地观察到EGFP在发育到原肠胚的转pRH3EGFP-1稀有鮈鲫中表达.在稀有鮈鲫幼体鱼苗中也可以清楚地观察到EGFP在多个组织中的泛组织表达.比较CMV启动子、鲤鱼β-actin启动子、虹鳟鱼组蛋白H3启动子的EGFP表达载体pCMVEGFP,pCAEGFP,pRH3EGFP-1在稀有鮈鲫胚胎中的表达特性,结果表明pCMVEGFP最早表达,其后为pRH3EGFP-1和pCAEGFP,表达的强度依次为pCMVEGFP＞pCAEGFP＞pRH3EGFP-1.这说明虹鳟鱼组蛋白H3启动子可以作为一种有效的启动子,应用于鲤科鱼类(如稀有鮈鲫)的转基因研究.
使用高保真PCR方法從虹鱒魚基因組中剋隆得到虹鱒魚組蛋白H3啟動子.將虹鱒魚組蛋白H3啟動子插入啟動子缺失的增彊綠色熒光蛋白(EGFP)錶達載體pEGFP-1中,構建成重組載體pRH3EGFP-1.通過顯微註射法得到轉pRH3EGFP-1稀有鮈鯽.在熒光解剖鏡下,可以清楚地觀察到EGFP在髮育到原腸胚的轉pRH3EGFP-1稀有鮈鯽中錶達.在稀有鮈鯽幼體魚苗中也可以清楚地觀察到EGFP在多箇組織中的汎組織錶達.比較CMV啟動子、鯉魚β-actin啟動子、虹鱒魚組蛋白H3啟動子的EGFP錶達載體pCMVEGFP,pCAEGFP,pRH3EGFP-1在稀有鮈鯽胚胎中的錶達特性,結果錶明pCMVEGFP最早錶達,其後為pRH3EGFP-1和pCAEGFP,錶達的彊度依次為pCMVEGFP＞pCAEGFP＞pRH3EGFP-1.這說明虹鱒魚組蛋白H3啟動子可以作為一種有效的啟動子,應用于鯉科魚類(如稀有鮈鯽)的轉基因研究.
사용고보진PCR방법종홍준어기인조중극륭득도홍준어조단백H3계동자.장홍준어조단백H3계동자삽입계동자결실적증강록색형광단백(EGFP)표체재체pEGFP-1중,구건성중조재체pRH3EGFP-1.통과현미주사법득도전pRH3EGFP-1희유구즉.재형광해부경하,가이청초지관찰도EGFP재발육도원장배적전pRH3EGFP-1희유구즉중표체.재희유구즉유체어묘중야가이청초지관찰도EGFP재다개조직중적범조직표체.비교CMV계동자、리어β-actin계동자、홍준어조단백H3계동자적EGFP표체재체pCMVEGFP,pCAEGFP,pRH3EGFP-1재희유구즉배태중적표체특성,결과표명pCMVEGFP최조표체,기후위pRH3EGFP-1화pCAEGFP,표체적강도의차위pCMVEGFP＞pCAEGFP＞pRH3EGFP-1.저설명홍준어조단백H3계동자가이작위일충유효적계동자,응용우리과어류(여희유구즉)적전기인연구.
