CAJ | 학술논문

为研究双剪接型2.2kb乙型肝炎病毒(HBV)基因组剪接变异体特异性新蛋白-yTPds的功能,以酵母双杂交系统的诱饵质粒pGBKT7克隆yTPds基因并转化酵母细胞AH109获得相应重组子,滤纸法及液相分析法测酵母转化子内β-半乳糖苷酶(β-gal)的活性,证实yTPds蛋白可反式激活酵母GAL4反应元件(GAL4 responsive element).在此基础上,为进一步探讨该蛋白反式激活作用的功能区域,以pGBKT7分段克隆yTPds基因,分别编码yTPds蛋白N端47个氨基酸(yTPds-N47)、N端75个氨基酸(yTPds-N75)、中部28个氨基酸(yTPds-M28)、C端92个氨基酸(yTPds-C92)、C端64个氨基酸(yTPds-C64)以及去除中部28个氨基酸的融合蛋白(yTPds-Fusion).各重组载体转化酵母细胞AH109获得相应转化子.滤纸法定性检测酵母转化子内β-gal活性,结果显示yTPds-N75、yTPds-M28、yTPds-C92蛋白可反式激活GAL4反应元件,液相分析法显示酵母转化子内β-gal活性强弱为yTPds-M28＞yTPds-N75＞yTPds-C92＞yTPds,提示yTPds蛋白反式激活作用的功能区域是其中部28个氨基酸,该区域对应于HBV preS1蛋白反式激活功能域.此研究证实双剪接型2.2kb乙型肝炎病毒(HBV)基因组剪接变异体特异性新蛋白具有反式激活作用,提示其可能具有重要的致病意义.
위연구쌍전접형2.2kb을형간염병독(HBV)기인조전접변이체특이성신단백-yTPds적공능,이효모쌍잡교계통적유이질립pGBKT7극륭yTPds기인병전화효모세포AH109획득상응중조자,려지법급액상분석법측효모전화자내β-반유당감매(β-gal)적활성,증실yTPds단백가반식격활효모GAL4반응원건(GAL4 responsive element).재차기출상,위진일보탐토해단백반식격활작용적공능구역,이pGBKT7분단극륭yTPds기인,분별편마yTPds단백N단47개안기산(yTPds-N47)、N단75개안기산(yTPds-N75)、중부28개안기산(yTPds-M28)、C단92개안기산(yTPds-C92)、C단64개안기산(yTPds-C64)이급거제중부28개안기산적융합단백(yTPds-Fusion).각중조재체전화효모세포AH109획득상응전화자.려지법정성검측효모전화자내β-gal활성,결과현시yTPds-N75、yTPds-M28、yTPds-C92단백가반식격활GAL4반응원건,액상분석법현시효모전화자내β-gal활성강약위yTPds-M28＞yTPds-N75＞yTPds-C92＞yTPds,제시yTPds단백반식격활작용적공능구역시기중부28개안기산,해구역대응우HBV preS1단백반식격활공능역.차연구증실쌍전접형2.2kb을형간염병독(HBV)기인조전접변이체특이성신단백구유반식격활작용,제시기가능구유중요적치병의의.