西北大学学报（自然科学版）
西北大學學報（自然科學版）
서북대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
1期
93-95,98
,共4页
许丹%郑瑾%孙丽娜%耿宜萍%李旭%王一理
許丹%鄭瑾%孫麗娜%耿宜萍%李旭%王一理
허단%정근%손려나%경의평%리욱%왕일리
HIV病毒样颗粒%真核表达%磷酸钙沉淀法
HIV病毒樣顆粒%真覈錶達%燐痠鈣沉澱法
HIV병독양과립%진핵표체%린산개침정법
目的 利用哺乳动物细胞表达HIV-1病毒样颗粒,为HIV-1病毒的生物学研究和进一步设计HIV-1中和优势表位预防性疫苗奠定基础.方法 以293T细胞作为宿主细胞,利用磷酸钙沉淀法将带有HIV-1病毒被膜蛋白gp160基因的pcDNA3.1/BaL gp160真核表达载体和带有HIV-1核心蛋白(gag)的pVRC3900真核表达载体共转染至293T细胞中,收集培养上清,经蔗糖不连续梯度离心,收集病毒样颗粒,经磷钨酸负染,透射电镜观察结果 .结果 以磷酸钙沉淀DNA转移技术,EGFP真核表达质粒为靶基因,293T细胞为宿主细胞,最佳转染效率达30%以上;将peDt NA3.1/BaL gp160(env)和pVRC3900(gag)真核表达质粒共转染,宿主细胞成功表达目的 蛋白,转染细胞培养上清经蔗糖密度梯度离心,电镜观察可见自行装配的HIV病毒样颗粒.结论 在真核细胞中表达HIV-1病毒样颗粒.
目的 利用哺乳動物細胞錶達HIV-1病毒樣顆粒,為HIV-1病毒的生物學研究和進一步設計HIV-1中和優勢錶位預防性疫苗奠定基礎.方法 以293T細胞作為宿主細胞,利用燐痠鈣沉澱法將帶有HIV-1病毒被膜蛋白gp160基因的pcDNA3.1/BaL gp160真覈錶達載體和帶有HIV-1覈心蛋白(gag)的pVRC3900真覈錶達載體共轉染至293T細胞中,收集培養上清,經蔗糖不連續梯度離心,收集病毒樣顆粒,經燐鎢痠負染,透射電鏡觀察結果 .結果 以燐痠鈣沉澱DNA轉移技術,EGFP真覈錶達質粒為靶基因,293T細胞為宿主細胞,最佳轉染效率達30%以上;將peDt NA3.1/BaL gp160(env)和pVRC3900(gag)真覈錶達質粒共轉染,宿主細胞成功錶達目的 蛋白,轉染細胞培養上清經蔗糖密度梯度離心,電鏡觀察可見自行裝配的HIV病毒樣顆粒.結論 在真覈細胞中錶達HIV-1病毒樣顆粒.
목적 이용포유동물세포표체HIV-1병독양과립,위HIV-1병독적생물학연구화진일보설계HIV-1중화우세표위예방성역묘전정기출.방법 이293T세포작위숙주세포,이용린산개침정법장대유HIV-1병독피막단백gp160기인적pcDNA3.1/BaL gp160진핵표체재체화대유HIV-1핵심단백(gag)적pVRC3900진핵표체재체공전염지293T세포중,수집배양상청,경자당불련속제도리심,수집병독양과립,경린오산부염,투사전경관찰결과 .결과 이린산개침정DNA전이기술,EGFP진핵표체질립위파기인,293T세포위숙주세포,최가전염효솔체30%이상;장peDt NA3.1/BaL gp160(env)화pVRC3900(gag)진핵표체질립공전염,숙주세포성공표체목적 단백,전염세포배양상청경자당밀도제도리심,전경관찰가견자행장배적HIV병독양과립.결론 재진핵세포중표체HIV-1병독양과립.
