CAJ | 학술논문

目的从形态学上证实小鼠实验性肺纤维化上皮细胞-间充质细胞转变(EMT)及骨桥蛋白(OPN)的表达变化.方法将60只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水对照组和博来霉素(BLM)模型组,采用口咽抽吸法经咽部注入气管50μl博来霉素溶液,对照组注入50μl生理盐水.分别在造模后第3d、7d、14d、21d及28d 5个时间点处死对照组及模型组小鼠.取小鼠左肺制备石蜡切片,行苏木素-伊红(HE)染色及天狼猩红染色观察肺组织形态变化及胶原增生情况;行表面活性物质相关蛋白-C(SP-C)、上皮型钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(vimentin)、成纤维细胞特异蛋白1(FSP1)和骨桥蛋白(OPN)免疫组织化学染色,观察肺纤维化上皮细胞.间充质细胞转变(EMT)形态与OPN表达,利用图像分析软件Image-Pro Plus 6.0(IPP6.0)测量切片积分吸光度(IA),并进行统计分析.结果 HE及天狼猩红染色显示出小鼠肺组织正常结构和纤维化形态变化,并且模型组小鼠肺组织的胶原生成量随时间推移而增加(P<0.05).免疫组织化学结果显示,模型组小鼠肺OPN表达量随病程进展持续升高,在纤维化期达到峰值.而对照组表达量很少(P<0.05);对照组SP-C在Ⅱ型肺泡细胞恒定表达,模型组SP-C持续增加,且胞体增大;对照组E-Cadherin表达量多,而模型组在肺实变部位几乎不表达,但肺实变部位产生波形蛋白及FSP1,这些蛋白提示肺纤维化存在EMT.结论 BLM诱导性肺纤维化中存在EMT,且与显著增加的OPN有潜在关系.
목적 종형태학상증실소서실험성폐섬유화상피세포-간충질세포전변(EMT)급골교단백(OPN)적표체변화.방법 장60지건강웅성C57BL/6소서수궤분위생리염수대조조화박래매소(BLM)모형조,채용구인추흡법경인부주입기관50μl박래매소용액,대조조주입50μl생리염수.분별재조모후제3d、7d、14d、21d급28d 5개시간점처사대조조급모형조소서.취소서좌폐제비석사절편,행소목소-이홍(HE)염색급천랑성홍염색관찰폐조직형태변화급효원증생정황;행표면활성물질상관단백-C(SP-C)、상피형개점단백(E-Cadherin)、파형단백(vimentin)、성섬유세포특이단백1(FSP1)화골교단백(OPN)면역조직화학염색,관찰폐섬유화상피세포.간충질세포전변(EMT)형태여OPN표체,이용도상분석연건Image-Pro Plus 6.0(IPP6.0)측량절편적분흡광도(IA),병진행통계분석.결과 HE급천랑성홍염색현시출소서폐조직정상결구화섬유화형태변화,병차모형조소서폐조직적효원생성량수시간추이이증가(P<0.05).면역조직화학결과현시,모형조소서폐OPN표체량수병정진전지속승고,재섬유화기체도봉치.이대조조표체량흔소(P<0.05);대조조SP-C재Ⅱ형폐포세포항정표체,모형조SP-C지속증가,차포체증대;대조조E-Cadherin표체량다,이모형조재폐실변부위궤호불표체,단폐실변부위산생파형단백급FSP1,저사단백제시폐섬유화존재EMT.결론 BLM유도성폐섬유화중존재EMT,차여현저증가적OPN유잠재관계.