生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
10期
1702-1706
,共5页
孢子色素%whiEa%阿维链霉菌%接合转移%基因置换%阿维菌素
孢子色素%whiEa%阿維鏈黴菌%接閤轉移%基因置換%阿維菌素
포자색소%whiEa%아유련매균%접합전이%기인치환%아유균소
以野生型阿维链霉茵NRRL8165为出发菌株,用PCR方法克隆孢子色素基因簇直系同源基因(whiEa)侧翼片段,并构建基因置换载体pHL643.将pilL643跨属接合转移进入阿维链霉菌NRRL8165,通过置换载体和染色体之间的同源双交换,对染色体上的whiEa基因簇进行置换,得到3株阿泊拉霉素抗性、硫链丝菌素敏感的重组菌株,均表现为孢子色素合成缺陷.通过Southern杂交分析,证明whiEa基因簇被置换.通过摇瓶发酵和HPLC检测,发现whiEa基因簇置换菌株所产阿维菌素产量明显提高,表明孢子色素与阿维菌素生物合成之间可能有竞争底物的现象.
以野生型阿維鏈黴茵NRRL8165為齣髮菌株,用PCR方法剋隆孢子色素基因簇直繫同源基因(whiEa)側翼片段,併構建基因置換載體pHL643.將pilL643跨屬接閤轉移進入阿維鏈黴菌NRRL8165,通過置換載體和染色體之間的同源雙交換,對染色體上的whiEa基因簇進行置換,得到3株阿泊拉黴素抗性、硫鏈絲菌素敏感的重組菌株,均錶現為孢子色素閤成缺陷.通過Southern雜交分析,證明whiEa基因簇被置換.通過搖瓶髮酵和HPLC檢測,髮現whiEa基因簇置換菌株所產阿維菌素產量明顯提高,錶明孢子色素與阿維菌素生物閤成之間可能有競爭底物的現象.
이야생형아유련매인NRRL8165위출발균주,용PCR방법극륭포자색소기인족직계동원기인(whiEa)측익편단,병구건기인치환재체pHL643.장pilL643과속접합전이진입아유련매균NRRL8165,통과치환재체화염색체지간적동원쌍교환,대염색체상적whiEa기인족진행치환,득도3주아박랍매소항성、류련사균소민감적중조균주,균표현위포자색소합성결함.통과Southern잡교분석,증명whiEa기인족피치환.통과요병발효화HPLC검측,발현whiEa기인족치환균주소산아유균소산량명현제고,표명포자색소여아유균소생물합성지간가능유경쟁저물적현상.
