CAJ | 학술논문

背景:在关节软骨损伤修复的过程中,由于目前实验室中常用的细胞因子存在半衰期短、价格昂贵等缺点,不能广泛应用于临床.目的:假设结缔组织生长因子对体外培养的兔关节软骨细胞增殖和表型有一定的影响,为组织学方法修复关节软骨缺损寻找新的细胞因子.设计、时间及地点:随机区组设计对照实验,于2007-08/2008-02在深圳龙岗中心医院完成.材料:健康1月龄新西兰大白兔2只:结缔组织生长因子为Propetech公司产品.方法:获取兔关节软骨组织,将其剪碎,Ⅱ型胶原酶消化法原代分离培养兔关节软骨细胞,待细胞铺满瓶底80%胰酶消化传代,取其第2代,细胞贴壁后随机分组,实验组分别加入30,50,100,150 μ g/L的结缔组织生长因子,对照组仅加入DMEM培养液进行体外培养.主要观察指标:采用倒置相差显微镜下观察细胞形态及数量改变,采用四唑盐(MTT)法检测不同浓度的结缔组织生长因子对软骨细胞增殖的影响,免疫组织化学法(SABC法)检测Ⅱ型胶原的表达情况.结果:①结缔组织生长因子作用下的兔关节软骨细胞生长迅速,呈典型的软骨细胞形态,部分细胞聚集成团,形成软骨结节.②结缔组织生长因子能显著促进兔关节软骨细胞增殖,与对照组相比差异具有显著性意义(P<0.01).不同质量浓度的结缔组织生长因子均能促软骨细胞增殖,100μg/L为最佳作用质量浓度(P<0.01).③结缔组织生长因子作用下的兔关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达增多,且始终为阳性.结论:结缔组织生长因子可以刺激体外培养的兔关节软骨细胞增殖,促进软骨特异性Ⅱ型胶原表达,维持软骨表型.结缔组织生长因子可能用来作为组织工程学修复软骨缺损,治疗骨关节炎的新的生长因子.
배경:재관절연골손상수복적과정중,유우목전실험실중상용적세포인자존재반쇠기단、개격앙귀등결점,불능엄범응용우림상.목적:가설결체조직생장인자대체외배양적토관절연골세포증식화표형유일정적영향,위조직학방법수복관절연골결손심조신적세포인자.설계、시간급지점:수궤구조설계대조실험,우2007-08/2008-02재심수룡강중심의원완성.재료:건강1월령신서란대백토2지:결체조직생장인자위Propetech공사산품.방법:획취토관절연골조직,장기전쇄,Ⅱ형효원매소화법원대분리배양토관절연골세포,대세포포만병저80%이매소화전대,취기제2대,세포첩벽후수궤분조,실험조분별가입30,50,100,150 μ g/L적결체조직생장인자,대조조부가입DMEM배양액진행체외배양.주요관찰지표:채용도치상차현미경하관찰세포형태급수량개변,채용사서염(MTT)법검측불동농도적결체조직생장인자대연골세포증식적영향,면역조직화학법(SABC법)검측Ⅱ형효원적표체정황.결과:①결체조직생장인자작용하적토관절연골세포생장신속,정전형적연골세포형태,부분세포취집성단,형성연골결절.②결체조직생장인자능현저촉진토관절연골세포증식,여대조조상비차이구유현저성의의(P<0.01).불동질량농도적결체조직생장인자균능촉연골세포증식,100μg/L위최가작용질량농도(P<0.01).③결체조직생장인자작용하적토관절연골세포Ⅱ형효원표체증다,차시종위양성.결론:결체조직생장인자가이자격체외배양적토관절연골세포증식,촉진연골특이성Ⅱ형효원표체,유지연골표형.결체조직생장인자가능용래작위조직공정학수복연골결손,치료골관절염적신적생장인자.