人GJB6基因表达载体的构建及鉴定
인GJB6기인표체재체적구건급감정
Construction of GJB6-DsRed fusion protein vectors
  • 万方数据
    中华耳科学杂志 중화이과학잡지
    CHINESE JOURNAL OF OTOLOGY
    2010年 4期 470-473 ,共4页

    李丽娜%张延平%孙玉蕊%张宗林%王戈%张晓强%冯冲%潘登科

    리려나%장연평%손옥예%장종림%왕과%장효강%풍충%반등과

    缝隙连接蛋白30%红色荧光蛋白%融合蛋白表达载体 縫隙連接蛋白30%紅色熒光蛋白%融閤蛋白錶達載體
    봉극련접단백30%홍색형광단백%융합단백표체재체
    目的 构建人野生型Cx30与红色荧光蛋白DsRed的融合蛋白表达载体,为揭示Cx30突变患者发病机制提供实验依据.方法 用PCR法扩增GJB6基因,将PCR产物与T载体连接,用双切酶酶切pEASY-GJB6与载体DsRed-N1,连接回收后的片断,构建野生型Cx30编码序列与PDsRed2表达载体,测序鉴定序列正确性.将GJB6-DsRed用脂质体转染HEK293细胞,荧光显微镜观察表达的融合蛋白.结果 GJB6-DsRed在HEK293细胞中高效表达,表达主要位于细胞膜中.结论 成功构建了人野生型Cx30与红色荧光蛋白DsRed的融合蛋白表达载体,为进一步研究非综合征性聋的致聋机制奠定了基础.
    목적 구건인야생형Cx30여홍색형광단백DsRed적융합단백표체재체,위게시Cx30돌변환자발병궤제제공실험의거.방법 용PCR법확증GJB6기인,장PCR산물여T재체련접,용쌍절매매절pEASY-GJB6여재체DsRed-N1,련접회수후적편단,구건야생형Cx30편마서렬여PDsRed2표체재체,측서감정서렬정학성.장GJB6-DsRed용지질체전염HEK293세포,형광현미경관찰표체적융합단백.결과 GJB6-DsRed재HEK293세포중고효표체,표체주요위우세포막중.결론 성공구건료인야생형Cx30여홍색형광단백DsRed적융합단백표체재체,위진일보연구비종합정성롱적치롱궤제전정료기출.
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